Prominenece UFLC 초고속 액상 크로마토그래프

신속분석은 중요 기술 과제로 활용돼 왔으나 LCMS의 급속한 보급과 함께 성가비 인상이 시급한 문제로 급부상하면서 신속화에 박차를 가하는 요인이 됐다.
빠른 분석은 분석 시간을 단축하는 것으로 일반적으로 크로마토그래피 기둥을 단축하거나 유동상의 유량을 높여 목적을 달성한다.그러나 일반적으로 사용되는 입경 5μm의 충전 기둥을 사용하면 어떤 방법으로든 분리 성능이 현저하게 저하되어 신속화가 의미를 잃게 됩니다.
따라서 다음과 같은 두 가지 방법이 발전할 수 있습니다.

• 소립경의 충전재를 사용하다
  이 방법을 통해 빠른 분리를 가능하게 할 것이다.그러나 크로마토그래피 기둥 안의 유동 저항의 증가로 인해 기기의 각 부품과 크로마토그래피 기둥이 받는 압력도 현저하게 증가할 것이다.
  
• 고온 분리
  비교적 높은 온도는 물질의 확산을 가속화할 수 있으며, 동시에 크로마토그래피 기둥 안의 유동 저항을 줄일 수 있으며, 또한 빠른 분리를 가능하게 한다.고온 분석은 기둥의 압력을 낮추는 데 효과적이지만 고온이 크로마토그래피 기둥의 열화를 일으키고 샘플의 분해를 초래하는 등 응용 시 주의를 기울여야 한다.
  배압 문제를 해결하기 위해 압력을 견디는 능력을 개선한 기구가 발전하였는데, 이런 종류의 기구는 일반적으로 비교적 비싸다.그러나 이 기기들은 샘플링 성능과 감도 면에서 타협을 하지 않을 수 없다.또한 충전재가 지나치게 미세화된 충전기둥은 하드웨어에 대한 요구가 높기에 이런 크로마토그래피기둥을 사용하여 개발한 분석법은 통용성을 희생시켰다.따라서 이 계측기를 일반적인 HPLC 분석에 사용하면 효율이 낮아진다.

빠른 분리를 지원하는 Prominence
Prominence는 표준 부품을 사용하여 연구원의 전통적인 분석 및 고속 분석의 요구를 동시에 충족시킬 수 있으며 최대 85 ℃ 의 작동 온도를 지원하여 더 낮은 압력에서 빠른 분석을 가능하게 할 수 있습니다. 또한 이 기기가 구현하는 분석 성능과 통량 수준은 더 비싼 기기 구성에서도 흔치 않습니다.

Prominence UFLC는 다음 특성을 통해 빠른 분석을 지원합니다.

• 작은 기둥관과 작은 부피의 유통지는 기둥 외봉의 넓이 효과를 낮춘다.
  
• 2.2μm 입자 크기의 크로마토그래피 기둥 Shim-pack XR-ODS를 사용합니다.
  Shim-pack XR-ODS는 위의 충전재 미세화 문제를 고려하여 분리 효율과 압력의 관계에서 교묘하게 균형을 찾아 분리 효과를 높이거나 유지하면서 분석 시간을 단축할 수 있는 차세대 신속 분석용 크로마토그래피 기둥이다.

  Chromatographic conditions; column: described above, phase: water/acetonitrile （3/7,v/v）, flow rate: described above, temperature: 40℃, detection: absorbance at 245 nm, sample volume: 4μL（XR-ODS）, 10μL（VP-ODS）.
  Peaks; 1: actophenone, 2: propiophenone, 3: butyrophenone, 4: balenophenone, 5: hexanophenone, 6: heptanophenone, 7: octanophenone.

• Prominence SIL-20A 자동 샘플링기는 10초 동안 10μl의 초고속 샘플링을 구현합니다.

  Chromatographic conditions; column: Shim-pack XR-ODS（3mm i.d.×30mm, 2.2μm）, phase: water/acetonitrile（4/6 to 2/8 in 0.4 min, convex gradient）, flow rate: 3mL/min, temperature: 80℃, detection: absorbance at 245 nm, sample volume: 4μL（each 800 nm ol）,.0.1 min delayed injection.
  Peaks; 1: actophenone, 2: propiophenone, 3: butyrophenone, 4: balenophenone, 5: hexanophenone, 6: heptanophenone, 7: octanophenone.

• 최대 85 ℃ 의 고온 분석을 지원합니다.
  온도와 빠른 분석: 기둥의 온도가 높아짐에 따라 이론 탑판의 수가 증가하고 기둥의 효과가 높아지며 기둥의 압력이 낮아진다.

  Chromatographic conditions;
  phase:　water/acetonitrile （3/7, v/v）,
  detection: absorbance at 245 nm.
  Peaks: 1: 아세톤 2: 아세톤 3: 아세톤 4: 아세톤 5: 아세톤 6: 아세톤 7: 아세톤

  온도가 화합물에 미치는 영향: 고온 분석은 기둥의 압력을 낮추는 데 효과적이지만 고온이 크로마토그래피 기둥의 열화를 일으키고 샘플의 분해를 초래하는 등 응용할 때 주의를 기울여야 한다.고온 분석은 단지 빠른 분석의 보조 수단으로 운용될 뿐이다.

• 높은 샘플링 주파수를 갖춘 검출기는 정보를 잃지 않고 신속하게 데이터를 얻을 수 있다.
  
• 일반적인 크로마토그래피 조건을 UFLC 조건으로 간단하고 쉽게 변환할 수 있는 특수 크로마토그래피 변환 소프트웨어를 사용하여 분석 방법의 공통성을 보장합니다.

신속한 분석의 재현성
빠른 분리에서 성분 보존 시간의 재현성을 얻는 것은 일반적인 분석보다 더 어렵다.보존 시간의 재현성(RSD)과 시간의 제곱근이 반비례하여 커지기 때문에 일반적인 분석보다 더 엄격한 송액 성능이 필요하다.Prominence UFLC는 송액 해상도 3nL/min의 미세 스트로크 송액, 그라데이션 송액 시 제어 응답 0.1초의 송액 능력을 보장하여 매우 우수한 보존 시간 재현성을 발휘할 수 있다.

하이패스란 무엇입니까?
빠른 액상 크로마토그래프의 목표는 높은 통량, 즉 매일 또는 매 시간 더 많은 샘플이 분석되는 것입니다.높은 통량을 실현하기 위해서는 단일 샘플 분석 시간을 단축해야 할 뿐만 아니라 전체 순환 샘플링 및 분석 시간도 최적화되어야합니다.신속화를 추구하는 본의는 분석 시간을 단축하는 것뿐만 아니라 분석 주기도 단축하는 것이다.Prominence UFLC의 시료 주입 속도는 10초로 분석 주기가 크게 단축되었다.

인스턴스 적용

PTC 파생 아미노산의 UFLC 분석

아미노산 분석에는 이온교환 크로마토그래피 기둥을 사용해 분리한 뒤 파생화해 재검출하는 기둥 후파생화법, 선파생화 후 반상 크로마토그래피 기둥을 사용해 분리하는 기둥 전파생법 등 두 가지 검출 방법이 있다.빠른 분석의 관점에서 볼 때, 기둥 앞 파생화법은 효과적이다.여기서 Shim-pack XR-0DS를 사용하여 더 짧은 시간에 아미노산 분석을 수행했습니다.
이소시안산페닐에스테르를 사용하여 파생화하다.기둥 뒤 파생법은 1시간, 기둥 앞 파생화법은 일반 크로마토그래피 기둥을 사용할 때 25분이 걸리는 분석을 4분으로 단축할 수 있다.

색소의 UFLC 분석

식품에 첨가되는 색소에는 수용성이 높아 HPLC로 많이 분석하는 합성화합물과 천연화합물이 있다.그러나 여러 색소를 조합할 때 동시에 분석하는 데 시간이 오래 걸린다.이는 Shim-pack XR-ODS 초고속 LC를 사용한 색소 동시 분석 사례를 나타냅니다.12가지 성분의 색소를 동시에 분석한 결과 다음과 같은 크로마토그래프가 나왔다.일반 LC를 사용하는 데 필요한 분석 시간은 50분이지만 초고속 LC를 사용하면 약 6분 만에 분석이 완료됩니다.

다환방향족탄화수소(PAHs)의 UFLC 분석

PAHs는 차량 등 배기가스가 대기 환경을 얼마나 오염시키는지 판단하는 화학물질이다.PAHs는 발암성이 강하기 때문에 이들 물질의 대기 측정이 중요한 측정 항목이다.PAHs는 강한 형광을 나타내며 형광 검출기를 이용하여 고감도 분석을 할 수 있다.
이 10가지 PAHs 분석의 경우 UFLC는 손실 없는 분리 상태에서 일반 LC(분석 시간 50분)에 비해 10배 빠른 속도(분석 시간 5분)를 구현했다.