돼지 링 바이러스 1형 염료 법형광 정량 PCR 시약함

돼지 링 바이러스1형 염료 법형광 정량 PCR 시약함
돼지 Circovirus 1 (PCV-1)

제품 및 특징:
돼지 링 바이러스 1형 염료 법형광 정량 PCR 시약함다음과 같은 특징이 있습니다.

1.즉시 사용 가능, 사용자는 바이러스 샘플만 제공하면 됩니다.

2. 돼지 링 바이러스 1형 염료법 보수 서열에 따라 설계된 전일성 유인물은 관련 바이러스와 교차 반응이 없다.

3. 수백 개의 복제본 / 반응에 도달할 수 있습니다.

4.1관식 형광 정량 PCR 검사, 후속 오염을 피한다.

5.이 시약함은 20μL 반응 체계의 형광 정량 PCR을 50회 충분히 할 수 있다.

6.본 제품은 과학 연구에만 적용되며 임상 진단에 사용할 수 없습니다.

운송 및 보존： 저온 운송,-20 ℃ 보존, 유효기간 1년。

자체 시약： DNA 템플릿, 10 × ROX (기종에 따라 결정되며 구체적인 사용 방법 참조).

사용 방법 하나,희석PCR 양성 대조(이)10E2-10E7 복제본 / μL 이 6 개의 10배 희석도 예)

1.주의: 표준품의 농도가 매우 높기 때문에 아래의 희석 작업은 반드시 독립된 구역에서 진행해야 하며, 절대 샘플이나 본 시약함의 기타 성분을 오염시켜서는 안 된다).제품 안정성 증대와 전염성 병원성 확산 방지를 위해 본 제품은 생체 샘플을 양성 대조로 제공하지 않고, 직접 사용할 수 있는 DNA 조각만 양성 대조로 제공한다.

2. 원심관 6개를 표시하고 각각 7, 6, 5, 4, 3, 2.

3.벨트 코어 헤드로 각각 45 μL 형광 PCR 전용 템플릿 희석액 (벨트 코어 헤드를 사용하는 것이 좋습니다, 이하 같음).

4. 7번 튜브에 5μL 1×10E8 카피/μL의 양성 대조를 넣어 1분간 충분히 흔들어 1×10E7 카피/μL의 양성 대조를 받는다.얼음 위에 올려 놓고 기다리다.

5. 총머리를 바꾸고 6번 튜브에 5μL 1×10E7 카피/μL의 양성대조(윗단계 희석소득)를 넣어 1분간 충분히 흔들어 1×10E6 카피/μL의 양성대조를 받는다.얼음 위에 올려 놓고 기다리다.

6. 총머리를 바꾸고 5번 튜브에 5μL 1×10E6 카피/μL의 양성을 넣어 5번 튜브에 대조하면 1분간 충분히 진동하여 1 × 10E5 카피/μL의 양성대조를 받는다.얼음 위에 올려 놓고 기다리다.

7. 위의 조작을 반복하여 6개의 희석도의 양성 대조를 얻을 때까지 한다.얼음 위에 올려 놓고 기다리다.

2. 견본DNA의 제조：

8. N개의 샘플이 있으면 N+2개의 추출을 설정해야 한다. 하나 더 나온 것은 PC(샘플 제조 양성 대조),

하나는NC(검체 제조 음성 대조).10μL로 단계별 PCR 양성대조가 가능한 4호(농도 1×10E4카피/μL, 10μL은 1만카피) 또는 5호(농도 1×10E5카피/μL, 10μL은 10만카피)에 일정량의 물을 더해 총체적을 매번 제조에 요구되는 부피와 동일하게 해 PC의 용수와 200μL을 시료로 해야 한다.

9. 자체 선택 방법으로 샘플을 순화시킨DNA，이 키트는 시중에 나와 있는 대부분의 바이러스 DNA 추출 키트와 호환됩니다.또한 자사의 일관식 바이러스 DNAout 또는 그 업그레이드된 기둥식 바이러스 DNAout을 선택할 수 있다.이 키트는 1관식 바이러스 DNAout 15회 무료 증정。

3. 설정qPCR 반응 (20 μL 체계, 시료 제조실에서 진행):

10. 하면, 만약, 만약...1회 반복하면 N+9개의 PCR 튜브가 표시되며, 이 중 N+2개는 이전 단계에서 얻은 N+2개에 사용됩니다.

샘플,1개는 PCR 음성 대조용, 6개는 PCR 양성 대조용이다.2-3회 반복하면 반응 설정 수가 2 또는 3배 증가합니다.

11. 표식관에 표를 눌러 각 성분을 첨가한다(이 표는 한 번만 반복적으로 나열된다.샘플관과 음성대조 설정이 완료된 후에야 양성대조를 설정할 수 있으며, 양성대조 샘플은 모든 관이 뚜껑을 덮고 저장된 후 마지막에 추가한다):

주: ABI7500, 7700 및 7900 기기만 대조용으로 ROX를 사용해야 하며, 기타 형광 PCR 기기(예:iCycler IQ、MJ Option、MJ Chromo4、MX3000、MX4000、RotorGene3000、RotorGene 6000 및 LightCycler480) ROX가 필요하지 않으면 물로 대체합니다.

12.뚜껑을 닫은 후 전원에 켜고 아래 매개변수에 따라 PCR을 진행합니다 (구체적인 PCR 매개변수는 기기에 따라 스스로 최적화 될 수 있습니다).

13. 데이터 수집

구체적인 조작은 사용하는 기구가 추천하는 절차에 따라 진행한다.본 제품에 포함된 형광 염료는 결합되지 않음DNA의 경우 최대 흡수 스펙트럼은 471nm, DNA를 결합했을 때의 최대 흡수 스펙트럼은 500nm, 최대 발사 스펙트럼은 530nm다. 신호 수집은 복성이나 연장 단계로 설정할 수 있다.

4. 데이터 처리:

14. 이 시약함을 정량검사에 사용한다면 양성대조농도의 log값을 가로축으로 하고 Ct값을 세로축으로 하여 표준곡선을 그린다.다시 시료의 Ct 값을 측정하여 표준 곡선에서 시료의 DNA 농도의 log 값을 추산한 다음 그 농도를 추산한다.

15. 본 시약함을 정성검사에 사용하고 양성이나 음성만 판단한다면 음성대조Ct는 반드시 40보다 크거나 같아야 한다.양성 대조는 반드시 형광 대수 증가가 있어야 하고, 전형적인 증폭 곡선이 있어야 하며, Ct 값은 30보다 작거나 같아야 한다.검체의 경우 Ct가 40보다 크거나 같으면 음성, 35보다 작거나 같으면 양성이다.35-40이면 한 번 반복합니다.반복 실험의 Ct 값은 40보다 크거나 같으면 음성, 40보다 작으면 양성이다.

과학 연구에만 사용할 뿐 임상 검사 및 치료에 사용할 수 없다.