NCI-H522 (인간 비소세포 폐암 세포)

NCI-H522 (인간 비소세포 폐암 세포)

브랜드: 상해연존생물
세포수: 1x10^6 cells
세포 활력: 95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
세포 이름:NCI-H522 (인간 비소세포 폐암 세포)

종속 출처: 사람
성별 나이: 남성, 58세
조직 출처: 폐
성장 특성: 벽에 붙어서 성장
세포형태: 상피체
세포 사양: 1 X 106cells/T25 또는 1 mL 냉동 튜브
배양 조건: RPMI-1640 + 10% fetal bovine serum(FBS)
37 ℃, 5% 이산화탄소
동결 보관 조건: 90% FBS + 10% DMSO
전대 방법: 1:3 ~ 1:6 전대, 1-2일 전대

세포 배양 조작
드라이아이스 운송: 세포를 받은 후 즉시 액체 질소로 옮겨 보존하거나 -80 ° C 냉장고로 단기간 냉동하거나 직접 소생시켜야 한다
상온 운송: 세포를 받은 후, 즉시 세포 배양병을 포장함에서 꺼내고, 아래 조작 절차에 따라 배양 전대를 진행하십시오
세포대물림: 세포밀도가 80~90% 에 달하여 대물림배양을 진행할수 있다
병속 세포 배양 조작 절차
벽에 붙여 배양한 세포에 대해 부치기 전에 우리는 배양기를 전체 배양병에 가득 채워 제품 운송 과정에서 벽에 붙인 세포의 탈락을 줄일 것이다.
1.세포를 받은 후 오염 여부를 주의 깊게 관찰하십시오.배양병을 거꾸로 현미경 아래에 놓고 혼탁 여부, 세균 오염 여부를 꼼꼼히 검사한다.운송 과정에서 흔들림이 존재하고, 일부 세포는 온도 변화에도 민감하기 때문에, 일부 세포가 떨어져 떠다니는 상황이 존재할 수 있으며, 이러한 세포는 여전히 살아있는 세포이므로 버리지 마십시오. 원심부집 후 대대로 사용할 수 있습니다.
2.밀착 세포의 경우, 생물 안전 캐비닛 환경에서 진공 펌프로 배양병의 여분의 배양기를 제거하고 5-8mL 정도 남은 후 배양기에 따라 적합한 CO2 함량의 37 ℃ 항온 배양함을 선택하여 배양하고 병뚜껑을 느슨하게 짠다.만약 세포가 이미 배양병에 가득 자랐다면, 즉시 전대하십시오.
3.부상하는 세포의 경우, 생물 안전 캐비닛 환경에서 배양병의 세포를 원심관으로, 150g의 원심을 5분간 전이하고, 상청을 제거한 후, 5mL의 배양기로 세포를 분산시켜 새로운 배양병으로 전이한 후 적합한 CO2 함량의 37 ℃ 항온 배양함에 넣어 배양한다.
냉동 보관관 세포 조작 절차
참고: 세포의 높은 활착률을 보장하기 위해 제품을 받은 후 즉시 해동하여 배양하십시오.
1.냉동보관관을 37 ℃ 의 수욕에 넣고 왔다갔다하며 빠르게 해동한다.오염을 피하기 위해서, 냉동 보관 파이프를 수면 위에 두어야 한다.해동은 약 1분 정도 빠르다.
2.냉동 보관 튜브에서 액체가 녹으면 즉시 제거하고 알코올 분사로 냉동 보관 튜브의 표면을 닦습니다.이 단계에서 다음 작업은 생물 안전 캐비닛에서 수행해야 합니다.
3. 냉동보관관에 있는 액체를 완배지 5mL가 함유된 원심관으로 옮겨 150g을 5분간 원심분리하고 진공펌프로 상청을 제거한다.
4. 배양기를 다 쓰고 세포를 다시 부유시켜 새로운 배양병으로 옮긴다.세포 소생의 생존율을 위해 배양기를 37℃ 수욕예열 후 사용하세요.
5. 적절한 CO2가 함유된 37℃ 항온배양함에 세포를 넣어 배양한다.
밀착 세포 전대 배양
1. 배양병 속 배양기를 흡수하고 버리고 PBS를 넣어 한 번 윤색한다.
2. Trypsin-EDTA 용액 1mL 0.25(w/v)를 넣고 37℃ 배양함에 넣어 세포가 벽에서 떨어져 분리될 때까지 부화한다.이 절차는 약 3-5분 정도 소요됩니다.
3. 완배지 2mL를 넣어 인슐린을 중화시키고 가볍게 불어 세포를 배지병 표면에서 떨어뜨려 분산시킨다.
4. 세포현액을 원심관 15mL에 모아 원심분리 150g을 5분간 진공펌프로 제거한다.적당량의 배양기를 취하여 세포를 다시 매달아 새로운 배양병으로 옮겨 배양한다.
부유세포 전대는 다음과 같은 방법을 참고할 수 있다.
1. 직접전대법
1.대기 부상 세포가 80~90% (세포 현액이 누렇게 변함) 까지 자라면 대물림할 수 있다;
2. 빨대로 세포현액 1 / 2 ~ 1 / 3을 흡입한다.
3. 적당량의 신선한 배양기를 넣고 계속 배양한다.
2. 원심전대법 (세포파편이 발견된 경우)
1. 세포 현액을 원심관 안으로 옮긴다.
2.150g 원심분리 5min, 상층 청액 버리기;
3. 신선한 배양기 중현세포를 사용한다;
4. 빨대는 적당량의 세포현액을 흡수하여 새로운 배양병에 넣고 적당량의 신선한 배양기를 첨가하여 계속 배양한다.
세포 동존 조작
1.1000rpm 원심분리 5분 상청 제거.혈청 중현세포 1mL를 첨가하고 세포 수량에 따라 혈청과 DMSO를 첨가하여 가볍게 섞는다. DMSO 종농도는 10%이고 세포밀도는 1x106/mL 이상이어야 한다. 각 동존관은 1mL 세포현액을 동존한다. 동존관에 주의하여 표시를 잘 해야 한다.
냉동 보관관을 프로그램 냉각함에 넣고, -80 ° C 냉장고에 넣고, 적어도 2시간 후에 액체 질소 관개 저장으로 들어간다

일부 관련 세포는 다음과 같습니다.