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호남성 장사시 우화구 로동동로 1299호 26동
호남중검비강생물기술유한회사
호남성 장사시 우화구 로동동로 1299호 26동
이 키트는 어플리케이션ELISA는기술 연구 개발한 약물 잔류 검사 제품,계기 분석 기술과 비교하면 경제적이고 빠르게 근육을 검출할 수 있다조직、사료, 소변 등 샘플 중의렉 도파민 함유량。
3. 교차반응률
유사 물질과의 교차 반응률:
렉 도파민…………………………………100%
세라마이드……………………………………﹤1%
염산도파안………………………………﹤1%
크론트로 ………………………………﹤1%
4. 시약함 구성
효소 표지판1블록,96구멍/판
표준액5병 (1mL/의병):
0 ppb、0. 1ppb、0.3ppb、0.9ppb、2.7ppb
효소 표기물 ………………………………………7mL
항체 작업액 ………………………………………10mL
바탕액A ………………………………………7mL
종지액……………………..…………………7mL
10×농축 세척액………………………………40mL
설명서……………………..………………1몫
다섯,사용 단위 자체 장비 및 시약
(1)계기
미공판 효소 표시기(450 nm); 질소 드라이 장치;발진기;원심분리기; 터빈;전자 저울(감량0.01 g)。
(2)기재
용량병:100ml,500ml,1000 mL
외길미량 변액기:20 μL~200 μL,100 μL~1000 μL
다도미량 변액기:30 μL~300 μL
(3) 시약
메탄올, 아크릴, 헥산, *, 농염산, 이온제거수
6. 용액의 조제
샘플 전처리는 조제해야 한다:
배액1:1M NaOH는용액
칭취4.0 g NaOH더하다이온제거수용해,정용100ml。
배액2:0.1M HCl은
측정0.83 mL농염산을 이온제거수에 첨가하다.정용100ml。
배액3:25%메탄올
측정25ml메탄올,75ml이온을 제거한 물에 충분히 섞다.
배액4:25%메탄올-0.1MHCL용액
측정20mL 0.1M염산용액에 가입80mL 25%메탄올용액에 충분히 섞다.
배액5:샘플 복용액
2×농축복용액사용하기 전에 누르십시오.1:1희석 (1몫농축샘플 복용액+ 1분리 이온수)。
배액6:세척 작업액
10×농축 세제는 사용하기 전에 눌러주세요1:9희석 (1분 농축세탁액체 + 9분리온수) (필요에 따라 구성 가능)。
7. 견본 전 처리 방법
샘플 처리 전 주의 사항:
(1) 실험에서는 일회용 헤드를 사용해야 하며, 다른 시약을 섭취할 때는 헤드를 교체해야 한다.
(2) 실험 전에 각종 실험 기구가 깨끗한지 검사해야 하며, 반드시 청정 실험 기구를 사용하여 오염이 실험 결과를 방해하지 않도록 해야 한다.
표본이전프로세스 단계:
(A)조 직물 처리 (닭, 오리, 돼지 근육/간, 계란, 생선, 새우 등)
처리 방법 1:
1, 정확성칭취2.0±0.02 g균장샘플50 mL원심관 중;
2, 가입0.5mL희석된 샘플 복용액(배액5), 충분히 진동2분, 가입8ml 아크릴충분히소용돌이 진동3~5 분, 실내 온도4000 r/분원심10 분;
3、取2.5 ml상층 액체또 다른 원심관 중,50~60℃ 질소 드라이;
4, 가입1 mL 헥사판은 잔여물을 용해하고, 다시 첨가한다.1ml샘플 재용액 (배액5), 충분히 혼합30 s, 실내 온도4000 r/분원심10 분;
5, 상층 헥사판을 제거하고,20 μL하층액 은 분석 에 쓰인다。
처리 방법 2:
1, 정확성칭취2.0±0.02 g균장샘플50 mL원심관 중;
2, 가입6ml25%메탄올-0.1MHCL용액,진동고르게 섞다3~5분,실온4000 r/분이상원심10 분(참고: 조직 샘플에 기름 함량이 높으면 진동 후 넣을 수 있습니다85℃ 수욕 10min 후 원심분리);
3、取1ml상층 액체다른 하나2ml원심관 중,가입20μL 1M* 용액 및 충분히 섞기 (섞은 후 측정pH값, 대략7-8);
4、4000 r/분원심3~5 분; 맑은 액체를 채취한다20 μL분석용。
(B)소변, 혈청
取20 μL맑은 소변 또는 혈청 직접 측정 (예: 소변 또는 혈청 혼탁
필터링 또는4000 r/분에15℃원심10 분청까지
밝은), 사용하지 않는 샘플은 냉동 보관해야합니다.
8. 효소연면역검사절차
측정 전 주의사항:
1、 사용하기 전에 모든 시약과 필요한 마이크로보드를 실온으로 되돌려줍니다.
2、 사용 후 즉시 모든 시약을 회수2~8 ℃。
3、 사용 중 미세한 구멍을 건조시키지 마십시오.
4、 에서ELISA는분석에서의 중복성은 대부분 세판의 일치성에 의해 결정된다. 정확한 세판 조작은ELISA는프로그램의 요점을 측정하다.
5、 모든 항온 부화 과정 중, 빛을 피하고,뚜껑판막이 미공판을 덮다.
측정 단계:
1、필요한 시약을및 마이크로 보드냉장 환경에서 꺼내어 실온에서 균형을 잡다30 분각 액체는 사용하기 전에 고르게 흔들어야 한다.표준 액체는 모두 만들어야 하니 주의하시오2개의 평행 시험.
2、표준품을 붙이다/샘플:더하다들표준품/샘플20 μL/구멍,가입효소표식물50 μL/구멍, 추가항체 작업액80 μL/구멍,가볍게 진동하여 고르게 섞다,쓰다덮개막 뚜껑을 잘 닫고,실온25℃하피광 반응30 분。
3、빨래판:뚜껑을 조심스럽게 벗기고 구멍 안의 액체를 털어내고,세제를 넣다 250 μL/구멍, 매번담그다15~30 s, 충분히 세탁4~5다음, 흡수지로 찍기해.
4、발색:구멍마다 먼저 추가바탕액A 50 μL, 다시 각각 가입바탕액B 50 μL, 가볍게진동고루 섞다실온25℃아래피광 반응10~15 분。
5、측정:구멍마다 더하기50 μL종료액,가볍게 진동하여 고르게 섞다효소 측정기에서450 nm처 측정OD는값 (권장450/630 nm이중 파장 감지,5 분내부 데이터 읽기).
9,결과 분석
측정된 표준 액체 또는 샘플 흡광도의 평균값 (B) 나누기
표준액 1개 (0표준액)의 흡광도(B0) 값 곱하기100%,
100% 흡광도를 얻다.
100% 흡광도 값 (%)=![]()
표준품 농도의10아래의 대수는X축, 백분율 흡광값은Y축, 표준 커브를 그립니다.샘플의 100% 흡광 값을 표준 곡선에 대입하여 표준 곡선에서 샘플에 대응하는 값을 읽어10의 멱 에 희석 배수 를 곱하면 시료 에 포함된 것이다렉 도파민의 양.
시약함 전문 분석 소프트웨어를 이용하여 계산하면 대량의 샘플의 정확하고 신속한 분석을 더욱 편리하게 할 수 있다.
십,샘플 희석 배수
동물 조직:2배 (방법 1),4배 (방법 2)
소변, 혈청 샘플:1배
십일, 키트 감도, 정확도, 정밀도
시약함 감도:0. 1ppb
샘플 검사 제한:
샘플 구성 (방법 1)…………………0.2ppb
샘플 구성 (방법 2)…………………0.4 ppb
소변, 혈청 샘플………………………0.1ppb
회수율:
조직샘플 …………………………75±20%
소변, 혈청 샘플………………………95±20%
정밀도: 시약함의 변이 계수는 모두 작다10%
십이, 고려 사항
1, 실내 온도 이하20 ℃시약 및 샘플이 실온으로 돌아오지 않았거나(20~25 ℃)모든 기준의OD는값이 낮습니다.
2, 세판 과정 중 판공이 건조한 상황이 발생하면 표준 곡선이 선형이 되지 않고 중복성이 좋지 않은 현상이 나타난다,따라서 세판 박자가 마른 후에는 즉시 다음 조작을 진행해야 한다.
3, 유효 날짜가 지난 시약 상자를 사용하지 마십시오;유효기간이 지난 시약함의 어떤 시약도 사용하지 말아야 한다. 유효기간이 지난 시약함을 섞으면 민감도가 떨어진다.다른 로트 번호의 키트에서 시약을 교환하지 마십시오.
4, 시약함 저장2~8 ℃, 냉동하지 말고, 사용하지 않는 마이크로 공판을 자봉봉지에 넣어 다시 밀봉한다;표준물질과 무색의 발색제는 빛에 민감하기 때문에 빛에 직접 노출되는 것을 피해야 한다.
5, 발색 시약어떤 색이든 발색제가 변질되었다는 것을 나타내므로, 마땅히 버려야 한다그.
6、가입 중바탕액후, 일반 발색15 분됩니다.색상이 옅으면 반응 시간을20 분(또는 그 이상) 이하여야 합니다.30 분;반대로 반응 시간을 줄인다.
십삼, 저장 조건 및 보존 기간
저장 조건:2~8 ℃시약함 저장。
보존 기간: 이 키트의 유효 기간은12개월.