인표피성장인자(EGF) ELISA 키트

인표피성장인자(EGF) ELISA 키트

실험 원리
이 시약함은 이중항체 협심법을 응용하여 표본중의 인표피생장인자(EGF) 수준을 측정한다.순화된 사람 표피성장인자(EGF) 항체로 팩을 미세 공판으로 만들어 고상항체를 만들고, 팩이 단항된 미세 구멍에 차례로 표피성장인자(EGF)를 넣은 뒤 HRP 표기된 표피성장인자(EGF) 항체와 결합해 항체-항원-효소 표적 항체 복합체를 형성하고, che 바닥 세탁 후 바탕인 TMB를 넣어 발색한다.TMB는 HRP 효소의 촉매로 파란색으로 바뀌고 산의 작용으로 최종 노란색으로 바뀐다.색상의 깊이는 시료의 표피성장인자(EGF)와 상관관계가 있다.효소표시기로 450nm 파장에서 흡광도(OD값)를 측정해 표준 곡선을 통해 시료 중 인표피 성장인자(EGF) 농도를 계산한다.

표본 요구 사항
1. 표본처리: (1) 물샘플을 채집한후 -20 ℃ 를 거쳐 3회 반복적으로 얼리고 다시 유리섬유의 려과를 거친후 검사를 준비한다
(2) 조직 샘플용 부탄올: 메탄올: 물 (5:25:70V:V:V) 추출 또는 관상
관련 문헌을 추출하여 진행하고, 추출 후에는 가능한 한 빨리 실험을 진행해야 한다.당장 실험을 진행하지 못하면,
표본을 -20 ℃ 에 보관하여 검사할 수 있다
2. NaN3이 매운 뿌리 과산화물 효소의 (HRP) 활성을 억제하기 때문에 NaN3가 함유된 샘플을 검출할 수 없다.

인표피성장인자(EGF) ELISA 키트작업 단계
1. 샘플링: 표준 구멍, 빈 구멍을 각각 설정합니다 (공백 대조 구멍은 샘플 및 효소 표적 시약을 추가하지 않으며 나머지 단계는 동일합니다),
테스트 대기 샘플 구멍.효소 표지판 위의 표준 구멍에 50마이크로리터를 더하고, 측정 대기 샘플 구멍에 먼저 샘플 희석액 40μl를 첨가하고,
그런 다음 측정 대기 샘플 10 μl (샘플의 최종 희석도는 5 배) 을 추가합니다.샘플링은 효소 표지판 구멍 밑부분에 샘플을 추가하여
구멍 벽에 닿지 않게 가볍게 흔들어 섞는다.
2. 효소첨가: 구멍당 효소표시시약 50μl 첨가, 공백구멍 제외.
3.온육: 봉판막으로 봉판한 후 37 ℃ 로 60분 동안 온육한다.
4. 배액: 30배 농축 세척액용 증류수 30배 희석 예비용
5.세탁: 봉판막을 조심스럽게 벗기고, 액체를 버리고, 털어내고, 구멍마다 세척액을 가득 채우고, 30초 동안 가만히 두었다가 버린다. 이렇게
다섯 번 반복해서 두드려라.
6. 발색: 구멍마다 발색제 A50 μl를 먼저 넣고 발색제 B50 μl를 넣어 가볍게 흔들어 섞고 37 ℃ 피광 발색
15분.
2
7. 종료: 매 구멍마다 종료액 50μl를 첨가하여 종료반응(이 때 파란색은 노란색으로 입전한다).
8. 측정: 빈 구멍으로 0을 조정하고 450nm 파장으로 각 구멍의 흡광도(OD값)를 순서대로 측정한다.측정은 플러스에서 종료되어야 합니다
수액 후 15분 이내 진행.

계산
표준 물건의 농도를 가로 좌표로, OD값을 세로 좌표로 하여 좌표 용지에 표준 곡선을 그리고 샘플의
OD값은 표준 커브에서 해당 농도를 확인합니다.희석 배수를 곱하기;또는 표준물의 농도와 OD값으로 표시를 계산한다
준곡선의 직선회귀방정식은 시료의 OD값을 방정식에 대입하여 시료의 농도를 계산하고 희석배수를 곱하여
샘플의 실제 농도입니다.

주의사항
1. 시약함은 냉장 환경에서 꺼내면 실온 균형이 15-30분 후에 사용할 수 있으며, 효소 표지판은 개봉 후
다 쓴 판자는 밀봉봉지에 넣어 보관해야 한다.
2. 진한 세척액은 결정이 석출될 수 있으므로 희석 시 수욕에서 온도를 높여 용해시킬 수 있으며 세척 시 결과에 영향을 주지 않는다.
3. 각 단계의 샘플링은 모두 샘플링기를 사용해야 하며, 항상 그 정확성을 교정하여 시험 오차를 피해야 한다.한 번에 샘플을 추가하는 시간이 가장 좋다.
5분 내로 제어하며 표본 수가 많으면 소총 샘플링을 사용하는 것을 추천합니다.
4.매번 측정과 동시에 표준 곡선을 만들어 주세요.복공을 하는 것이 좋습니다.표본에 측정 대기 물질 함량이 너무 높은 경우(샘플 OD값
표준품 구멍의 첫 번째 구멍보다 큰 OD값), 먼저 샘플 희석액으로 일정 배수 (n배) 희석한 후 측정, 계
계산할 때 마지막으로 총 희석 배수 (×n×5) 를 곱하십시오.
5.봉판막은 일회용으로만 사용하여 교차오염을 피한다.
6. 바탕은 빛을 피해 보관하세요.
7. 엄격히 설명서의 조작에 따라 진행하며 시험결과 판정은 반드시 효소표시기의 판독수를 기준으로 한다.8. 모든 시료, 세척액과 각종 폐기물은 전염물에 따라 처리해야 한다.
9. 본 시약은 서로 다른 로트 번호의 성분을 혼용해서는 안 된다.

사양:
96인분 / 박스

저장 조건 및 유효기간
1. 시약함 보관:;2-8℃。
2. 유효기간: 6개월