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ELISpot Flex: Human IFN-감마 (ALP) 인간 인터페론 검사
MABTECH ELISPOT 실험 원리
ELISPOT 실험은 PVDF 막을 기반으로 한 96 공판(cat: MSIPS 4510, Millipore)을 사용하며, 세포에서 분비되는 세포 인자를 포획하기 위해 특이성 단일 클론 항체(독성이 없고 내독소가 없으며 친화력이 높은 항체가 필요함)를 패키지에 장착한다.
그런 다음 배양판의 구멍에 검사할 세포와 항원 자극물을 넣어 배양한다.자극물의 자극으로 T세포는 대응하는 시간대에 대응하는 세포인자를 분비한다.이때 세포인자는 막에 싸인 항체에 의해 포획된다.
세포를 씻어내면 포획된 세포인자가 바이오틴이 표시한 제2항체와 결합한 다음 효소표친화소와 바이오틴을 결합하여 화학효소연현색을 진행하면 막의 국부에 하나하나의 원형반점 (물론 형광소표시의 제2항체도 사용할수 있어 후속적인 화학현색방법을 생략하고 한번에 여러가지 세포인자를 검사할수 있다.) 이 당초에 대응하는 세포인자를 분비하게 된다.
막에 있는 반점의 수를 집계해 당초 구멍에 넣은 세포 총수로 나누면 양성세포의 백분율을 계산할 수 있다.
MABTECH는이 기술은 다음과 같은 세 가지 이점을 제공합니다.
1: 감도가 높습니다.백만 개의 세포 중 한 개의 세포가 세포인자를 분비하면 검출될 수 있으며, 전통적인 ELISA 방법에 비해 2~3개의 수량급이 향상되었다.
2: 단세포 수준, 활세포 기능 검사.엘리스포트는 항원으로 살아있는 세포를 직접 자극하는 것으로 살아있는 세포의 기능을 측정한다.
3: 조작이 간편하고 경제적이며 높은 통량선별을 진행할수 있다.ELISPOT은 복잡한 세포 체외 증폭 과정 없이 동위원소를 사용하지 않으며, 표준화된 실험 조작에 따라 한 실험자가 수백 개의 샘플을 동시에 처리할 수 있어 다른 검사 방법보다 효율이 훨씬 높다.
ELISpot Flex: Human IFN-감마 (ALP) 인간 인터페론 검사
MABTECH: 3420-2A에는 다음이 포함됩니다.
캡처 mAb 1-D1K1개의 mg/ml600 μl
탐지 mAb 7-B6-1의 비오틴1개의 mg/ml50 μl
Streptavidin-ALP는50μl