- 이메일
- 전화
-
주소
상해시 청포구 심벽돌도로 221호 2동 1층
포장 사양] 25T/박스 & 50T/박스
【검사원리】
이 시약함은 이 유전자에 대해 특이성 유인물과 분자 비콘 탐지기를 설계하였으며, 검사 대기 샘플에 이 샘플이 포함되어 있다DNA는의 경우,PCR는반응이 진행되어 형광 신호를 방출할 수 있다.계기쌍을 이용하다PCR는과정 중 상응하는 형광 신호는 실시간 모니터링과 출력을 진행하여 검측 결과의 정성 분석을 실현한다.
[주요 구성 성분]
번호 |
구성 |
25T/박스 |
50T/박스 |
1 |
PCR는반응액 |
500μL×1의튜브 |
1000μL×1의튜브 |
2 |
양성 대조 |
40 μL × 1튜브 |
40 μL × 1튜브 |
3 |
음성 대조 |
40 μL × 1튜브 |
40 μL × 1튜브 |
4 |
설명서 |
1몫 |
1몫 |
【저장조건 및 유효기간】빛을 피하다-20℃다음 보존, 반복 냉동 방지, 유효기간12개월.
【적용 기구】ABI는시리즈,바이오-라드시리즈,Agilent Stratagene MX는시리즈,로쉬 LightCycler R480、세페이드 SmartCycler、로터 유전자시리즈, 항저우 박일 시리즈 등 다중 채널 실시간 형광 정량PCR는의.
【견본 요구】
1. 원본 표본을 사용하여 테스트하는 경우표본 (환자의 뇌척수액, 정맥혈, 관절액, 병축정맥혈, 유즙, 균락, 균태 등) 은 신선하게 채집하고 쌍증멸균수 또는 멸균생리염수를 사용하는 부유한 원시표본이어야 한다.
2. 증균 후 필요한 경우PCR는검사는 선택적 증균액을 사용하여 원시 표본에 대해 증균을 진행해야 한다.
3. 표본 수집 후 즉시 검사할 수 없으면 배치 가능2~8℃냉장 하룻밤 보관;만약 장기간 보존해야 한다면, 표본은 반드시 동결하여 보관해야 한다.-20℃~-80℃。
【검사방법】
1. 시약 준비 (시약 준비 구역)
(1) 냉장고에서 시약함 꺼내기,시약함에서 실험에 필요한 시약을 꺼내 충분히 녹여 섞고 순식간에 원심을 분리하여 관벽에 부착된 액체를 제거한다.
(2) 해당 실험에 필요한 반응 수 계산 (n) 그리고 아래 표에 표시된 반응체계에 따라 이번 실험에 필요한 각종 시약량을 계산한다.
n =음성 대조수 (1T)+양성 대조수 (1T)+오차 예약량(1T)+샘플 수
단반액 조제표(매부) |
PCR는반응액(UNG는효소 및Taq는효소) |
20μL |
(3) 무균 원심관에 상술한 시약을 첨가하여 충분히 혼합한 후 순식간에 원심을 분리한다.따라20μL/분장량을 관리하여 시약을PCR는반응관.
(4) 꽉 닫기PCR는반응관 뚜껑 뒤PCR는반응관이 샘플 처리 구역으로 옮겨졌다.남은 시약을 돌려놓다-20℃이하 냉장고는 냉동 보관한다.
2.샘플 준비 (샘플 처리 영역)
쓰다DNA/RNA시약함을 추출하여 핵산을 추출하면 되며, 구체적인 조작은 그 시약함 설명서에 따라 조작한다
3.샘플링
상술한 에서 제조한 것PCR는반응 샘플관에 각각 처리된 대기 표본을 첨가하다.DNA는각5 μl, 최종 볼륨25 μl/의꼭꼭 닫아PCR는반응 뚜껑 혼합 후 순간 저속 원심, 이동PCR는계기상.음성 대조와 양성 대조는 각각 추가한다5 μL시약함 자체 음성 대조 또는 양성 대조품, 최종 부피는25 μl/의꼭꼭 닫아PCR는반응 뚜껑 혼합 후 순간 저속 원심, 이동PCR는계기상.
4.PCR는(PCR는확장 지역)
(1) 샘플 처리 영역에서 준비된PCR는반응관, 실시간 형광 정량에 배치PCR는샘플 슬롯의 해당 위치와 배치 순서를 기록합니다.
(2) 계량기 설정 계기 핵산 증폭 관련 파라미터를 눌러 진행PCR는증폭하다.
반응체적 |
25 μL |
채널 선택 |
FAM은채널 채집포 형광 신호 |
|
PCR는 반응 조건 |
단계 |
조건 |
순환수 |
UNG는처리 |
37℃:2분 (분) |
1 |
|
예변성 |
95℃:3분 (분) |
1 |
|
PCR는증폭 |
95℃:5초 (s) |
40 |
|
|
55℃:40초 (s) (이 단계 종료 시 형광신호 수집) |
참고:ABI는계열 형광PCR는설정할 때 선택 안 함ROX는교정, 담금질 기단 선택 설정없음。
[참조 값 (참조 범위)]
1.키트 유효성 판정:
(1) 양성대조: 전형이 있다S유형 확장 커브 또는Ct는값≤35。
(2) 음성 대조:Ct는값>38또는 없음Ct는값, 선형은 직선 또는 경미한 사선으로 지수 성장기가 없다.
2.표본 결과 판정:
(1) 양성: 표본 검사 결과Ct는값≤35뚜렷한 지수 성장기가 있을 수도 있다.
(2) 의심: 표본 검사 결과Ct는값은35~38범위 내.이때 표본을 중복 검사해야 한다. 예를 들어 중복 실험 결과이다.Ct는값은 여전히35~38범위 내에서 뚜렷한 지수 성장기가 있으면 양성으로 판정하고 그렇지 않으면 음성으로 판정한다.
(3) 음성: 표본검사 결과Ct는값>38또는 없음Ct는값.
[검사 결과의 해석]
채널 및 테스트 결과 |
표본 검측 결과 해석 |
FAM은 | |
양성(+) |
표본에서 체크 아웃 |
음성 (-) |
표본에서 체크 아웃되지 않음 |
[검증 방법의 한계]
1.검사 샘플에서 검사 된 핵산 농도가 이 시약 상자보다 낮을 때 검출 된 가짜 음성의 결과가 발생할 수 있습니다.
2.피검견본은 채집, 운송, 저장 및 처리과정에서 조작방식이 부당하여 쉽게 초래할수 있다DNA는분해되어 가짜 음성 결과가 나오다.
3.샘플 수집, 운송, 저장 및 처리 과정에서 교차 오염이 발생하면 가짜 양성 결과를 쉽게 얻을 수 있습니다.
[제품 성능 지표] 제품의 체크 아웃 제한은 다음과 같습니다.103사본/mL, 제품CV는값≤3%。
【주의사항】
1.본 시약함을 사용하는 실험실은 국가 관련 부분에서 반포한 관련 유전자 증폭 검사 실험실 관리 규범에 따라 엄격히 관리해야 한다;
2. 피하기 위해RNA는분해, 샘플 처리 과정은0-4℃조건에서 조작하고 실험을 완료한 후 즉시 컴퓨터에 접속하여 검사한다;샘플 처리 과정에서 사용되는 기구 소모품은 무핵효소 처리를 거쳐야 한다;
3.각 구역의 물품은 모두 전용이다.오염되지 않도록 교차 사용해서는 안 된다;검사가 끝나면 즉시 작업대를 청소해야 합니다.
4.반응액을 흡수할 때는 기포가 생기지 않도록 해야 한다.상PCR는 기기전에 액체가 증발하여 결과가 정확하지 않도록 각 반응관이 꼭 덮여있는지 주의해서 검사해야 한다.
5. 시약함의 모든 시약은 사용하기 전에 상온에서 충분히 녹여 섞어야 하며 순간적으로 원심을 분리해야 한다.
6.시약함 안에 배합된 음성과 양성 대조는 1차 사용 전에 모두 표본 준비 구역으로 옮겨 따로 보관해야 한다;
7. 형광 방해를 방지하기 위해 맨손으로 직접 접촉하는 것을 피해야 한다PCR는반응관, 그리고PCR는반응관에 모든 표시;
8. 검사 과정에서 사용한 흡입헤드는 담겨야 한다10%차아염소산 폐기물 항아리 안에서 검측이 끝난PCR는 반응관, 뚜껑을 열지 말고 다른 폐기 물품과 함께 멸균한 후 버려야 한다;작업대 및 각종 실험용품은 정기적으로 사용해야 한다 10%차아염소산,75%알코올이나 자외선을 소독한다.
계기 증폭 관련 파라미터는 본 설명서의 관련 요구에 따라 설치해야 한다.서로 다른 로트 시약은 혼용할 수 없다;유효 기간 내에 사용합니다.제품은 과학 연구에만 사용됩니다.。