블루 혀 바이러스 효소 결합 항체 ELISA 검사 키트

파란 혀 바이러스 효소 결합 항체 검사 테스트제 상자 사용 설명서

검측 원리

본 시약함은 블루설 바이러스 항원에 미리 포장된 효소 표지판, 효소 표기물 및 기타 부대 시약으로 구성되며, 실험 시 효소 표지판에 대조 혈청과 검사 대기 샘플을 첨가하고, 온육 후 샘플에 블루설 바이러스 항체가 함유되어 있으면 효소 표지판의 항원과 결합하여 세척을 거쳐 결합되지 않은 기타 성분을 제거한 후;다시 효소표기물을 첨가하여 효소표지판의 항원항체복합물과 특이성결합을 일으킨다.다시 세척을 거쳐 결합되지 않은 효소표기물을 제거하고 구멍에 TMB 바탕물액을 첨가하여 효소표시결합물과 반응하여 푸른색 산물을 형성하며 발색깊이는 견본중의 특이성항체함량과 상관관계가 있다.종지액을 넣어 반응을 종료하면 산물이 노란색으로 변한다.효소표시기로 450nm 파장에서 각 반응공의 흡광값을 측정하면 시료에 람설바이러스항체가 함유되여있는가를 알수 있다.

시약함 구성

저장 및 유효기간

2~8 ℃ 보존, 유효기간 12개월.

가방 이불판은 개봉 후 2~8 ℃ 에서 빛을 피하여 보관하여 습기가 차지 않도록 하십시오.사용 기간은 2개월이다.

적용 기기

450nm 파장을 함유한 효소표시기, 37 ℃ 항온설비, 미량이액기를 조절할수 있다.

샘플 준비

1.동물의 전혈을 채취하여 일반적인 방법에 따라 혈청을 제조하고, 혈청의 청량을 요구하며, 용혈이 없고, 오염이 없다.샘플은 1주일 내에 2~8 ℃ 에서 보존할 수 있으며, 장기적으로는 -20 ℃ 에서 보존해야 한다.

2. 농축세척액을 사용하기 전에 침전이 녹도록 실온으로 회복한 후 증류수나 이온제거수로 20배로 희석하여 작업세척액으로 만들어야 한다(예를 들어 증류수 19개나 이온제거수에 농축세척액 1개).

검사 방법

1.사용하기 전에 시약함을 실온으로 30분 두었다가 실온으로 회복한다.

2.필요한 용량의 효소 표지판을 취하여 음성, 양성 대조 각 1구멍을 설치하고, 사용하지 않은 판자는 가능한 한 빨리 밀봉하여 2~8 ℃ 로 보존한다.

3. 샘플 구멍에 먼저 5ul 검사 대기 샘플을 넣고 95ul 샘플 희석액을 넣어 충분히 진동하고 섞는다.

4. 음성, 양성 대조 구멍에 각각 음성, 양성 대조 100μl를 넣는다.

5.골고루 섞고, 덮개막을 잘 덮고, 37 ℃ 온상자에 넣어 30분 동안 부화시킨다.

6. 구멍 안의 액체를 털어내고 구멍마다 250ul의 작업 세척액을 넣고 진동 혼합 방식으로 60초 동안 세탁한 후 버리고 5회 반복 세탁한다. * 후에 한 번 마른 액체를 두드린다.

7.구멍당 효소표시물 100μl를 첨가하고 37 ℃ 의 피광반응을 30분간 둔다.

8.구멍 안의 액체를 털어내고, 구멍마다 250ul의 작업 세척액을 첨가하고, 진동 혼합 방식으로 60초 동안 세탁한 후 버리고, 5회 반복 세탁하고, * 후에 한 번 마른 액체를 두드린다.

9.샘플 수량에 따라 발색액 A와 발색액 B를 등체적 비율로 혼합하여 바탕물 작업액으로 배치하고, 현재 배합하여 사용한다.구멍당 100ul을 더하고 37 ℃ 의 피광반응을 10분간 설치하며 전체적인 발색속도가 너무 빠른 상황이 있을 경우 5분 앞당겨 발색을 끝낼수 있으며 발색시간 * 길이는 15분을 초과하지 않는다.

10.구멍마다 종지액 100μl를 넣고 골고루 섞어 450nm에서 구멍별 흡광값(OD값)을 측정한다.

참조 값

실험이 정상인 경우 양성대조 OD-음성대조 OD> 0.2.

검사 결과의 해석

1.S/P =(검체 OD-음성대조 OD)/(양성대조 OD-음성대조 OD).

2. S/P ≥ 0.4 시 결과는 양성으로 판독한다.

3.0.2<S/P<0.4일 때 결과는 항체 효가가 부족하거나 감염이 의심될 수 있음을 고려한다.

4. S/P<0.2 시 결과는 음성으로 판독됩니다.

시험방법의 한계성

1.본 시약함은 정성 검사 샘플 중 파란 혀 바이러스 항체의 대략적인 평가로서만 사용됩니다.

2.본 시약함은 연구용으로만 사용할 수 있으며 임상실험이나 인체실험에 사용할 수 없습니다.

주의사항

1.실험조작시 장갑을 끼고 작업복을 입어야 한다.소독격리제도를 엄격히 건전화하고 집행해야 한다.각종 실험페기물은 모두 전염물에 따라 처리해야 한다.

2.종지액은 부식성이 있으므로 피부와 옷에 닿지 않도록 해야 합니다.부주의로 접촉하면 즉시 대량의 수돗물로 씻으십시오.

3.효소 표지판은 냉장 환경에서 꺼낼 때 실온으로 회복해야 봉지를 열 수 있다.다 쓰지 않은 효소 표지판은 건조제가 있는 밀봉봉지에 넣어 보관해야 한다.

4. 농축 세척액은 저온에서 쉽게 결정될 수 있으므로 사용 시 실온으로 회복되어 용해되어야 한다.

5. 검측에 사용되는 샘플은 신선함을 유지해야 한다.

6. 시험결과의 판정은 반드시 효소표시기의 판독수를 기준으로 해야 한다.

7.서로 다른 로트 시약 성분은 혼용해서는 안 된다.