바나나 신장방패 탐침법 qPCR 시약함(내삼 제외)

바나나 신장방패 탐침법 qPCR 시약함(내삼 제외)

Aonidiella comperei McKenzie 프로브 실시간 PCR 키트 (내부 제어 없음)

바나나 신장방패 탐침법 qPCR 시약함(내삼 제외)제품 및 특징:
TaqMan 프로브 기반 실시간 형광 정량 PCR 기술.바나나 신장 방패의 특정 유전자 서열을 위해 특이성 유인물과 TaqMan 형광 프로브를 설계합니다.PCR 반응 체계에서 바나나 신장 방패의 핵산이 존재하면 유인물은 특이적으로 해당 구역에 결합하여 Taq DNA 중합 효소 작용으로 유전자 증폭을 진행한다.이와 동시에 형광탐침과 증폭된 목표DNA서렬의 특이성교잡, Taq효소는 연장과정에서 형광탐침을 절단하여 형광기단과 담금질기단을 분리시켜 형광신호를 방출한다.형광 신호의 변화를 실시간으로 모니터링함으로써 샘플 중 바나나 신장 방패에 대한 검사를 실현한다.다음과 같은 특징이 있습니다.

1.즉시 사용 가능, 사용자는 샘플 DNA 템플릿만 제공하면 됩니다.

2.유인물 및 프로브는 100 복제/반응에 도달하도록 분석 민감성이 높도록 최적화되었습니다.

3.양성대조를 제공하여 가짜음성견본을 쉽게 구분할수 있다.

4.특이성이 높고, 유인물은 바나나 신장 방패 DNA 고도 보수 구역에 따라 설계되었으며, 다른 DNA와 교차 반응을 일으키지 않습니다.

5. 정성 검사와 정량 검사에 모두 사용할 수 있다.선형 범위는 정량에 사용되는 수량 레벨 5개 이상입니다.

6.본 제품은 20μL 체계의 탐침 법형광 정량 PCR 반응을 50회 충분히 할 수 있습니다.

7.본 제품은 과학 연구에만 사용할 수 있습니다.

사양 및 구성 요소:

운송 및 보관:저온 운송, -20 ℃ 보존, 보존 기간은 12 개월입니다.
자체 시약 샘플 DNA.

바나나 신장방패 탐침법 qPCR 시약함(내삼 제외)사용 방법:
1. 표준곡선견본을 희석한다(10E1-10E6 복제본/μL 이 6개의 10배 희석도의 경우).표준품 농도가 매우 높기 때문에 아래의 희석 작업은 반드시 독립된 구역에서 진행해야 하며, 절대 샘플이나 본 시약함의 기타 성분을 오염시켜서는 안 된다).제품의 안정성을 높이고 전염성 병원의 확산을 피하기 위해 본 제품은 생체 샘플을 양성 대조로 제공하지 않으며, 전염성이 없는 DNA 조각만 양성 대조로 제공한다.

1. 6개의 원심관을 표시하고 각각 6, 5, 4, 3, 2, 1.

2.벨트 코어 헤드로 각각 45 μL 형광 PCR 전용 템플릿 희석액을 첨가하고, 벨트 코어 헤드를 사용하는 것이 좋습니다, 이하 같음).

3. 6번 튜브에 5μL 1×10E7 카피/μL의 양성 대조(시약함 제공)를 넣어 1분간 충분히 흔들어 1×10E6 카피/μL의 표준 곡선 샘플을 얻는다.얼음 위에 올려 놓고 기다리다.

4. 총머리를 바꾸고 5번 튜브에 5μL 1×10E6 카피/μL의 양성 대조(윗단계 희석으로 얻은 것)를 넣어 1분간 충분히 흔들어 1×10E5 카피/μL의 표준 곡선 샘플을 얻는다.얼음 위에 올려 놓고 기다리다.

5. 총머리를 바꾸고 4번 튜브에 5μL 1×10E5 카피/μL의 양성 대조(윗단계 희석으로 얻은 것)를 넣어 1분간 충분히 흔들어 1×10E4 카피/μL의 표준 곡선 샘플을 얻는다.얼음 위에 올려 놓고 기다리다.

6. 위의 작업을 반복하여 6개의 희석도의 표준 곡선 샘플을 얻을 때까지 한다.얼음 위에 올려 놓고 기다리다.

2. 샘플 DNA의 제조

7. N개의 샘플이 있다면 N+2개의 추출을 설정하는 것이 좋다. 하나 더 나온 것은 PC(샘플 제조 양성 대조), 하나는 NC(샘플 제조 음성 대조)이다.10μL의 상부에서 얻은 4호 희석액에 일정량의 물을 더하여 총체적을 매번 제조에서 요구하는 시작체적과 같게 하여

PC. 또한 물을 NC로 사용합니다.

8.자체 선택 방법으로 샘플의 DNA를 순화합니다.이 시약 상자는 시장의 대부분의 샘플 DNA 추출 시약 상자와 호환됩니다.우리 회사의 추출 면제 핵산 방출제도 골라 살 수 있다.

3. Probe qPCR 반응(20μL 체계, 시료 제조실에서 진행)

9. 정량 분석을 하고 반복을 한 번만 하면 N+9개의 PCR 튜브를 표시하고 이 중 N+2개를 표시한다

이전 단계에서 얻은 N + 2 개의 샘플에 사용되며, 1 개는 PCR 음성 대조 (물로 템플릿을 만드는 것), 6 개는 표준 곡선에 사용됩니다.정성 분석을 하고 1회 반복만 하면 N + 4개의 PCR 튜브를 표시하는데, 그 중 N + 2개는 이전 단계에서 얻은 N + 2개의 샘플, 1개는 PCR 음성 대조 (물로 템플릿), 1개는 PCR 양성 대조 (6단계 4호 튜브의 양성 대조 희석액으로 직접 템플릿) 이다.다음은 정량 분석을 예로 들어 작업 단계만 설명합니다.

10. 표식관에 표를 눌러 각 성분을 넣는다(이 표는 한 번만 반복적으로 나열합니다.샘플 튜브와 음성 대조 설정이 완료된 후에야 양성 대조를 설정할 수 있으며, 양성 대조 샘플은 모든 튜브가 뚜껑을 닫고 저장된 후 마지막에 추가해야 합니다):

11. 뚜껑을 닫고 전원에 올라 다음 매개변수를 눌러 PCR을 진행한다.

4. 데이터 처리

12.이 시약함을 정량검사에 사용한다면 양성대조농도의 log값을 가로축으로 하고 Ct값을 세로축으로 하여 표준곡선을 그린다.다시 시료의 Ct 값을 측정하여 표준 곡선에서 시료의 DNA 농도의 log 값을 추산한 다음 그 농도를 추산한다.

13.만약 본 시약함을 정성검사에 사용하고 양성이나 음성만 판단한다면 음성대조Ct는 반드시 수치가 없거나 Ct값이 40보다 크거나 같아야 한다.양성 대조는 반드시 형광 대수 증가가 있어야 하고, 전형적인 증폭 곡선이 있어야 하며, Ct 값은 40보다 작아야 한다.측정 샘플의 경우 Ct가 40보다 작으면 양성입니다.Ct 값이 없거나 40보다 크거나 같으면 음성입니다.
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