알라딘 RIPA 분해액(강함) - 상비현물

알라딘 R301899-100ml RIPA는분해액 (강함)

알라딘 RIPA 분해액(강함) - 상비현물

제품 번호:R301899-100ml

제품 이름:RIPA는분해액 (강함)

제품 사양:100ml

제품 소개:

사양 또는 순도: 억제제 없음

영어 이름:RIPA Lysis 버퍼 솔루션 (강한)

보관 온도:2-8°C저장

운송 조건: 아이스팩 운송

RIPA는분해액은 전통적인 조직 및 세포 급속 분해액으로, 주로 동물 조직과 포유류 세포에서 가용성 단백질을 추출하는 데 사용되며, 밀착 세포와 부유 세포를 분해하는 데 사용될 수 있다.그 분해액의 강도에 따라 강, 중, 약 세 종류로 나눌 수 있으며 실험 수요에 따라 상응하는 제품을 선택할 수 있다.RIPA는분해액(강)세포핵, 세포막, 포장단백질을 효과적으로 추출할수 있으며 추출한 단백질은 단백질정량,웨스턴 블롯、IP등 검측 분석.

구체적인 제품의 매개 변수는 제품 설명서를 받은 매개 변수를 기준으로 한다

알라딘 RIPA 분해액(강함) - 상비현물

사용 방법

(일)벽에 붙어 세포를 배양하다.

1.본 제품을 실온에 넣고 용해하여 고르게 섞고, 실험 요구에 따라 효소 억제제를 첨가한다.

2.붙박이 세포 배양액 제거, 용PBS는、NS는또는 무혈청 배양액 세척1다음, 저속 원심, 상청을 버리고 침전을 남긴다.

3.따라 6 슬레이트 구멍마다 추가150～250μl의효소 억제제를 함유한 분해액의 비율로 본 제품을 첨가합니다.이액기를 가볍게 불어 분해액과 세포가 충분히 접촉하도록 한다.얼음 위에 놓거나4℃분해, 일반적으로 분해액은 세포에 작용한다 1～3s안에서 세포가 분해됩니다.보통 6 슬레이트 구멍마다 세포가150μl의분해액은 충분하지만 세포 밀도가 매우 높으면 분해액의 용량을 적당히 늘릴 수 있다 200～250μl의。

4.10000～12000g，4℃원심 5～10분(만약 저온 원심분리기가 없다면 실온에서 원심분리를 해도 된다), 상청을 취하다.

5.후속SDS-페이지、서부, 면역침전과 면역공침전 등 조작.

(이)부유배양세포

1.본 제품을 실온에서 용해하여 골고루 섞은 후, 효소 억제제를 첨가한다.

2.저속 원심 부상 세포, 상청 버리고 침전 수집.

3.손가락으로 세포를 가볍게 튕겨 풀어준다.따라 6 슬레이트 구멍마다 세포가150～250μl의효소 억제제를 함유한 분해액의 비율로 본 제품을 첨가합니다.보통 6 슬레이트 구멍마다 세포가150μl의분해액은 충분하지만 세포 밀도가 매우 높으면 분해액의 용량을 적당히 늘릴 수 있다 200～250μl의다시 손가락으로 가볍게 튕겨 세포를 충분히 분해시키고, 충분히 분해된 후에는 뚜렷한 가늘고 포침전이 없어야 한다.

4.10000～12000g，4℃원심5～10분(만약 저온 원심분리기가 없다면 실온에서 원심분리를 해도 된다), 상청을 취하다.

5.후속 작업 수행SDS-페이지、서부, 면역침전과 면역공침전 등 조작.

(삼)조직 샘플

1.본 제품을 실온에서 용해하여 골고루 섞은 후, 효소 억제제를 첨가한다.

2.팀을zhi는작은 조각으로 잘라 작을수록 좋다.

3.액체 질소 나 초저온 냉장고 에서 추출하여 냉동 하다30분이상의 조직은 신속하게 액체 질소로 연마하고, 연마 과정은 가능한 한1～2분안쪽으로 단백질의 분해를 줄인다.

4.매번20mg조직 가입 150～250μl의분해액의 비율로 효소 억제제를 함유한 분해액을 넣는다.얼음 위 또는4℃분해 15～30분。

5.단계 3、4 또한 각 프로세스에 따라20mg조직 가입 150～250μl의분해액의 비율에 효소 억제제가 함유된 본품을 첨가하다.유리 균열기 또는 조직 연마기로 균일하게 하여 충분히 분해될 때까지 이 과정은 가능한 한 1～2분안쪽으로 단백질의 분해를 줄인다.

6.10000～12000g，4℃원심 5～10분(만약 저온 원심분리기가 없다면 실온에서 원심분리를 해도 된다), 상청을 취하다.

7.후속 작업 수행페이지、서부, 면역침전과 면역공침전 등 조작.

주의사항

1.밀착세포의 배양액을 제거한 뒤 혈청 속 단백질에 방해가 없다면 세척하지 않아도 된다.

2.분해가 충분하지 않으면 분해액 사용량을 적당히 늘릴 수 있고, 고농도의 단백질 시료가 필요하다면 분해액 사용량을 적당히 줄일 수 있다.

3.만약 세포량이 비교적 많으면, 반드시 분장해야 한다 50～100 만세포/원심관, 그리고 분해.큰 덩어리의 세포는 비교적 충분히 분해되기 어렵지만, 소량의 세포는 분해액이 세포와 충분히 접촉하기 쉽기 때문에 상대적으로 비교적 쉽게 충분히 분해된다.

4.만약 조직 샘플 자체가 매우 작다면, 적당히 잘라낸 후 직접 분해액을 넣어 분해할 수 있으며, 강렬함을 통해Vorte×의샘플을 충분히 분해시키다.그리고 마찬가지로 원심분리를 하여 후속 실험에 사용한다.직접분해의 장점은 비교적 편리하고 균장기를 사용할 필요가 없으며 균장기를 사용하는것처럼 비교적 충분히 분해되는것이 단점이다.

5.저온 상황에서 혼탁 현상이 나타날 수 있지만,37℃수욕은 용해를 촉진하여 사용 효과에 영향을 주지 않는다;용해 시간이 너무 길지 않아 유효 성분이 효력을 잃지 않도록 한다.

6.분해된 산물에는 항상 작은 덩어리의 투명 접착제가 나타나는데, 정상적인 현상에 속한다.이 투명 접착제는 게놈을 함유하고 있다DNA는등의 복합물.및 게놈을 감지하지 않음DNA는특히 긴밀한 단백질을 결합한 경우 원심분리를 직접 취하여 후속 실험에 사용할 수 있다;게놈과 특히 밀접하게 결합된 단백질을 검사해야 할 경우 초음파 처리를 통해 이 투명 접착제를 깨뜨려 흩뜨린 뒤 원심분리를 통해 청을 채취해 후속 실험에 사용할 수 있다.

7.세포 분해의 조작 절차는 얼음 위에 두거나4℃진행하다.

사용 범위

일반 생물학 및 의학 연구에 적용

제품 주문 정보:

R301899-100ml RIPA는분해액 (강함) 100ml