배양기병의 열림은 미생물 실험, 세포 배양의 가장 중요한 부분으로, 그 조작 규범성은 후속 실험의 성공률을 직접 결정한다-부당한 조작은 배양기 오염, 성분 실효를 초래할 수 있으며, 심지어 실험자의 안전 위험을 초래할 수 있다.핵심 원칙은"무균 제어"와"조작 안전"에 초점을 맞추고 준비에서 마무리까지 완전한 표준화 프로세스를 구축해야 한다.
사전 준비는 무균 보장의 기초이다.조작 전 실험 환경을 확인해야 한다: 생물 안전 캐비닛이나 초정화 작업대는 미리 자외선 소독 30분을 켜고 통풍 20분 후에 조작해야 한다;실험인원은 무균장갑, 실험복을 착용해야 하며 만약 열성미생물배양과 관련된다면 마스크와 고글도 착용해야 한다.동시에 배양기병 상태를 검사한다: 병의 파손 유무, 밀봉막이 완전한지, 라벨이 배양기 유형, 멸균 날짜 및 유효기간을 명확하게 표시하는지 관찰하며, 유효기간을 초과하거나 배양기 혼탁, 침전 이상 등 상황이 발생하면 직접 폐기하여 열 필요가 없다.
열기 작업은 3단계로 정확하게 실행됩니다.첫걸음은 표면소독으로서 배양기병을 작업대 중앙에 놓고 75% 의 의료용알콜을 묻힌 무균거즈로 병입구를 중심으로 나선식으로 병의 표면과 병뚜껑을 닦으며 중점적으로 병뚜껑과 병의 맞물리는 곳을 소독하여 먼지나 미생물이 조작에 따라 반입되지 않도록 해야 한다.소독후 알콜이 전부 휘발되기를 기다리면서 알콜의 잔류가 배양기에 혼입되여 세포나 미생물의 생장에 영향을 주지 않도록 방지해야 한다.
두 번째 단계는 병뚜껑이 열리는 것으로, 병 입구가 위로 향할 때 공기 중의 오염물이 떨어지지 않도록"병 입구가 아래로 기울어지는"자세를 유지해야 한다.한 손은 병의 중하부를 잡고 고정하고, 다른 한 손은 엄지와 검지로 병뚜껑의 가장자리를 잡고 반시계 방향으로 천천히 회전하여 병뚜껑이 느슨해질 때까지 회전시킨 후, 전부 떼지 말고 1~2바퀴의 나사 연결 상태를 유지하여 병에서 발생할 수 있는 압력을 천천히 방출한다. 특히 고압 멸균 후의 배지 병은 고온 멸균 후 내부에 음압이 형성될 수 있으며, 갑자기 전부 열면 외부 공기가 급속히 유입되기 쉽다.
세 번째 단계는 병 입구의 2차 소독과 조작이 연결되어 있으며, 병뚜껑을 모두 제거한 후 즉시 무균 핀셋으로 새로운 무균 거즈를 집어 알코올에 묻히고, 병 입구 안쪽과 나사를 빠르게 닦은 후 병뚜껑을 무균 조작 구역 (병뚜껑 안쪽이 위쪽을 향하고 오염에 노출되지 않음) 에 거꾸로 놓는다.오픈 후의 배양기 병은 가능한 한 빨리 분리 포장 또는 접종 조작을 진행해야 하며, 잠시 사용하지 않을 경우 무균 봉인막으로 병 입구를 감싸고 4 ℃ 냉장고에 넣어 냉장해야 하며, 냉장 시간은 24시간을 초과하지 않으며, 다시 사용하기 전에 병 입구 소독 절차를 반복해야 한다.
작업 마무리는 예외 처리와 마찬가지로 중요합니다.사용 후의배양기병, 잉여 배지를 포함하고 있을 경우, 염소 소독제를 첨가하여 멸균한 후 버려야 한다;만약 조작과정에 부주의로 열리지 않은 배양기병을 뒤집으면 소독면으로 오염구역을 덮고 소독제를 뿌린후 30분간 가만히 있다가 다시 정리해야 한다.동시에 조작 기록을 구축하고, 오픈 시간, 사용자 및 배지 상태를 표시하여 실험 소급에 근거를 제공한다.
배양기병의"정확한 열림"은 간단한 물리적인 열림이 아니라 무균리념의 구상화조작이다.환경 소독에서 병 입구 방호에 이르는 모든 세부 사항은 실험의 정확성과 안전성을 보장하는 중요한 방어선이며, 특히 세포 치료, 미생물 제약 등 고정밀 분야에서 표준화의 오픈 프로세스는 실험 결과의 신뢰할 수 있는 기초 전제이다.
