1 범위: 본 표준은 의약공업무균실과 청정구역에서 부유균의 시험조건과 시험방법을 규정하였다.

이 기준은 의약공업 무균실과 청정구역, 무균실 또는 국부 공기정화구역(청정작업대 포함)의 부유균의 테스트 및 환경검증에 적용된다.

2 참조 기준: GB/T 16293?2010

약품생산관리규범 (1998개정) 부록.

3 표준

청결도	생미생물 수 / m3
100 레벨	5
10000 레벨	100
100000 레벨	500

4 테스트 방법

4.1 방법 개요

본 표본이 채택한 방법은 계수 농도법이다.즉 공기 중에 떠도는 생물성 입자를 전문적인 배지 (미생물의 성장을 지원할 수 있다는 것을 증명할 수 있는 배지를 선택) 에 수집하여 약간의 시간과 적당한 성장 조건 하에서 가시적 균락 계수로 번식시켜 이 청결실의 미생물 농도를 판정한다.

4.2 인원의 직책 및 교육

무균실의 테스트 인원은 본 교육을 진행하고 상응하는 자격을 획득해야만 무균실 테스트에 대한 직책을 이행할 수 있으며, 여기에는 관련된 위생 지식과 기본적인 미생물 지식이 포함되어 있다.

무균실의 테스트 인원은 생산 조작의 공기 청정도 요구에 부응하는 착용 방식을 선택해야 하며, 바깥의 옷은 100000급 이상의 구역에 가져갈 수 없다.

4.3 계측기, 보조설비 및 배양기

기름이 없는 공기 펌프, 낮은 기류 유속 및 더 큰 샘플링 유량을 포함하여 적합한 부유균 샘플링기를 선택하여 배지 표면의 물 분포가 드라이되도록 보장합니다.

이 테스트에는 다음과 같은 장비, 보조 장비 및 배양 기반이 필요합니다.

a) 부유균 샘플링기;

b) 배양그릇;

c) 압력소독솥;

d) 배양기;

e) 항온 배양함;

4.4 부유균 샘플링 원리

부유균 샘플링기는 일반적으로 충돌법 기리를 채택하여 틈새식 샘플링기, 원심식 또는 바늘구멍식 샘플링기로 나눌 수 있다.이음매식 시료기는 내부 풍기가 기류를 흡입해 시료기의 이음매식 평판을 통해 채집 공기를 분사해 느린 평판 배지 표면에 부딪히고, 부착된 살아있는 미생물 입자는 배양한 뒤 균락을 형성한다.원심식 샘플링기는 내부 풍기의 고속 회전으로 인해 기류가 샘플링기의 앞부분에서 뒷부분으로 진입하여 흘러나오며, 원심력의 작용하에 공기 중의 살아있는 미생물 입자는 충분한 시간을 가지고 부딪히는 고형 배지에 살아있는 미생물 입자가 부착되어 배양된 후 균락을 형성한다.핀홀식 샘플링기는 기류가 금속 뚜껑 하나를 통해 흡입되고, 뚜껑에는 기계 가공을 거친 특제 작은 구멍이 밀집되어 있으며, 송풍기를 통해 수집된 미세한 공기를 평면 배지 표면에 직접 부딪히고, 부착된 활물 미생물 입자는 배양 성형을 거쳐 균락을 형성한다.

4.5 테스트 요점

4.5.1 반드시 측정 기구의 검정 주기에 따라 정기적으로 측정 기구를 검정해야 한다.검정에 합격하고 유효기간 내의 기구를 사용해야 한다.

4.5.2 테스트 기기가 피측 구역에 들어가지 않았을 때 필요하면 먼저 표면을 씻거나 해당하는 무균 실내에 준비하고 보관한다(보호 덮개 또는 기타 적당한 외부 덮개로 기기를 보호한다).

4.5.3 100급 무균실내에서 종이를 사용할 때는 투명하고 먼지가 묻지 않는 덮개를 덮어야 하며 100급 무균실내에서는 연필의 지우개를 사용할 수 없다.

4.5.4 테스트 기구를 사용할 때 설명서에 따라 엄격하게 조작해야 한다.

4.5.4.1 기기가 켜지고 예열이 안정된 후에야 설명서의 규정에 따라 기기를 교정할 수 있으며 동시에 샘플링 유량을 검사하고 샘플링 양에 따라 시간을 설정할 수 있다.

4.5.4.2 샘플링구는 소독이 편리하고 화학성능이 안정된 재료로 제조해야 한다.

4.5.4.3 샘플링관은 누출을 엄금하고 내벽은 매끄러워야 한다.

4.5.4.4 샘플링관의 길이는 측정점의 높이에 따라 정해야 하며 구부러짐을 최소화해야 한다.

4.6 배양그릇

4.6.1 일반적으로≥90mm×15mm 규격의 배양접시를 사용한다.선택한 샘플링기에 따라 적합한 배양접시를 선택할 수 있습니다.

4.6.2 원심식 샘플링에 사용되는 고형 배양봉

4.7 배지

카제인 글리세린 배양기(TSA) 또는 사스 배양기(SDA) 또는 다른 사용자가 인정하고 경험한 배양기.

4.8 항온 배양함

반드시 정기적으로 항온 배양함에 대해 효험을 진행해야 한다.

4.9 테스트 단계

4.9.1 테스트 전 기구, 배양접시 표면은 반드시 엄격하게 소독해야 한다.

4.9.1.1 샘플링기는 측정된 방에 들어가기 전에 먼저 소독실의 소독제로 멸균하고, 100급 무균실의 샘플링기에 사용한다

미리 측정된 방에 두는 것이 좋다.

4.9.1.2 소독제로 배양그릇의 겉면을 깨끗이 닦는다.

4.9.1.3 샘플을 채취하기 전에 먼저 소독제로 샘플링기의 덮개, 회전판 및 덮개의 안팎을 소독하고 샘플링이 끝난 후에 소독제로 덮개의 내벽과 회전판을 가볍게 분사한다.

4.9.1.4 샘플링구 및 샘플링관은 사용하기 전에 반드시 고온으로 멸균해야 한다.만약 소독제로 샘플링관의 외벽 및 내벽을 소독할 때 관의 잔류액을 버리고 말려야 한다.

4.9.1.5 검체채취자는 측정된 청정구역에 상응하는 작업복을 착용하고 회전판에 배양그릇을 넣거나 바꾸기전에 두손을 소독제로 소독하거나 무균장갑을 끼고 조작해야 한다.

4.9.1.6 샘플링기기는 소독을 거친후 먼저 배양그릇에 넣지 않고 부유균샘플링기를 켜서 기기중의 잔여소독제를 증발시키고 시간이 5min 이상이여야 하며 류량을 검사하고 샘플링량에 따라 설정시간을 조절해야 한다.

4.9.1.7 부유 샘플링기를 닫고 배양그릇에 넣고 뚜껑을 닫는다.

4.9.1.8 샘플링 포트를 샘플링 지점에 설치한 후 플랑크톤 샘플링을 위해 플랑크톤 샘플링기를 켭니다.

4.10 배양

4.10.1 전체 샘플링이 끝나면 배양그릇을 항온배양함에 부어 배양한다.

4.10.2 콩카제인진지배양기 (TSA) 로 배합한 배양은 표본추출을 거친후 30 ℃ ~35 ℃ 배양상자에서 배양하는데 시간이 2d 이상이여야 한다. 사씨배양기 (SDA) 로 배합한 배양그릇은 표본추출을 거친후 20 ℃ ~25 ℃ 배양상자에서 배양하는데 시간이 5d보다 적지 않다.

4.10.3 매 배양기는 대조시험을 하여 배양기본체의 오염여부를 검사해야 한다.각 3마리씩 배양접시를 선정해 대조배양할 수 있다.

4.11 균락계수

4.11.1 배양접시에 있는 모든 균락을 육안으로 직접 계수하거나 표시하거나 균락계수기에 점계한 후 5~10배 확대경으로 누락 여부를 검사한다.

4.11.2 만약 평판에 2개 또는 2개 이상의 균락이 중첩되면 변명할 수 있을 때 여전히 2개 또는 2개 이상의 균락으로 계수한다.

4.12 고려사항

4.12.1 사용하기 전에 각 배양그릇의 품질을 꼼꼼히 검사해야 한다. 배양기 및 배양그릇이 변질되거나 파손되거나 오염된 것은 사용할 수 없는 것이다.

4.12.2 배양기, 배양조건 및 기타 매개 변수에 대해 상세하게 기록한다.

4.12.3 세균의 종류가 매우 많고 차이가 매우 크기 때문에 계수할 때 일반적으로 배양그릇의 표면이나 진면에 투사광선을 사용하여 자세히 관찰하고 계배양그릇의 가장자리에서 생장하는 균락을 누락하지 말아야 하며 반드시 균락이나 배양기가 침전되는 물구별이 필요하면 현미경으로 감별해야 한다.

5 테스트 규칙

5.1 테스트 조건

테스트에 앞서 무균실 관련 매개 변수를 미리 테스트해야 합니다. 이런 테스트는 부유 입자의 환경 조건을 테스트합니다. 예를 들어 이런 사전 테스트는 다음과 같습니다.

a) 온도 및 상대 습도 측정.무균실 의 온도 와 상대 습도 는 생산 및 공정 요구 에 적합해야 한다

응 (특별한 요구가 없을 경우 온도는 18 ℃ ~26 ℃, 상대 습도는 45% ~65% 사이가 적당하다).동시에 가득

측정 기구의 사용 범위를 충분히 측정한다.

b) 실내 송풍량 또는 풍속의 테스트의 테스트 또는 압차의 테스트;

c) 필터의 누출 테스트

5.1 테스트 상태

정적 상태와 동적 상태 모두 테스트할 수 있습니다.

정적 테스트 시 실내 테스트 인원은 2명 이상이어야 한다

부유균 테스트 전에, 측정된 무균실 (구역) 은 사용자가 미리 소독해야 하는지 여부를 결정한다.

부유균 테스트 시 테스트 시 채택한 상태와 실내 테스트 인원 수를 표시해야 한다.

5.3 테스트 시간

5.3.1 빈 상태나 정적 a에서 테스트할 때 단방향 유무균실의 경우 공기조절시스템의 정상적인 운행시간이 10min 이상이면 테스트를 시작하는 것이 좋다.비단방향 유무균실에 대한 테스트는 정화 시스템의 정상 운행 시간이 30min 이상이면 시작하는 것이 좋다.정적 b 테스트 시 단방향 흐름 청정은 (구) 이며, 테스트는 생산 작업자가 현장에서 철수하고 10min 자정을 거친 후 시작하는 것이 좋다;비단방향 무균실에 대한 테스트는 생산 작업자가 현장에서 철수하고 20min 자정을 거친 후 시작하는 것이 좋다.

5.3.2 동적 테스트를 할 때 생산 시작 시간과 테스트 시간을 기록해야 한다.

5.4. 부유균 농도의 계산

5.4.1 샘플링 포인트 수량 및 배치

5.4.1.1 샘플링 소수점

부유균의 샘플링 지점 위치는 GB/T16292-2010을 참조할 수 있다

a) 작업구역 측정점의 위치는 땅에서 0.8~1.5m 정도 떨어져 있다 (작업면보다 약간 높다).

b) 송풍구 측정점 위치는 송풍면에서 30cm 정도 떨어져 있다.

c) 주요 장치 또는 주요 작업 활동 범위에 측정 지점을 추가할 수 있습니다.

5.4.2 소샘플링

부유균의 매번 소샘플링량은 표1을 보십시오.

표 1 작은 샘플링

정결	샘플링 양 L/회
100 레벨	1000
10000 레벨	500
100000 레벨	100
300000 레벨	100

5.4.3 샘플링 횟수

각 샘플링 지점은 일반적으로 한 번 샘플링됩니다.

5.4.4 샘플링 고려사항

5.4.4.1 단방향 유무균실이나 송풍구의 경우 샘플링기 샘플링구는 정대기류 방향으로 향한다.비단방향 유무균실의 경우 샘플링구가 위로 향합니다.

5.4.4.2 샘플링 지점을 배치할 때 적어도 먼지 입자가 집중된 환풍구는 피해야 한다.

5.4.4.3 샘플을 채취할 때 테스트 인원은 샘플링 입구의 하풍 쪽에 서서 가능한 한 적게 움직여야 한다.

5.4.4.4 샘플링 과정의 오염과 샘플에 대한 다른 오염을 방지하기 위해 모든 조치를 취한다.

5.4.4.5 배양접시는 검사에 사용할 때 배양접시의 운송이나 운반과정에 미치는 영향을 피하기 위하여 음성대조시험을 동시에 진행하여 매번 또는 매 구역마다 1개의 대조접시를 취하여 표본추출접시와 같은 방법으로 조작하지만 표본추출접시를 노출해서는 안되며 표본추출후의 배양접시(TSA 또는 SDA)와 함께 배양함에 넣어 배양한 결과 균락이 없이 생장해야 한다.

5.5 레코드

테스트 보고서에는 다음이 포함되어야 합니다.

a) 테스트자의 이름과 주소, 테스트 날짜;

b) 테스트 기준

c) 시험무균실의 평면위치(필요시 인접구역 평면위치 표시);

d) 테스트 기기 및 테스트 방법에 대한 설명: 테스트 환경 조건, 샘플링 포인트 수 및 배치도, 테스트 횟수, 샘플링 트래픽, 또는 존재할 수 있는 테스트 방법의 변경, 테스트 기기의 검정 증서 등을 포함한다.동적 테스트의 경우 현장 작업자 수와 위치, 현장 가동 설비와 수량과 위치도 기록해야 한다.

e) 결과: 모든 통계적 계산 자료를 포함합니다.

5.6 결과 계산

5.6.1 계수방법으로 각 배양접시의 균락수를 산출한다.

5.6.2 각 측정점의 부유균 평균 농도의 계산, 견식 (1).

평균 농도(개/m3) = 균락수/샘플링량????????????? (1)

예 1: 어떤 측정 지점의 샘플링량은 400L이고, 균락수는 1이면:

평균 농도 = 1/0.4 = 2.5개/m3

예2: 어떤 측정점의 샘플링량은 2m3이고 균락수는 3이면:

평균 농도 = 3/2=1.5개/m3

5.7 결과 평가

5.7.1 각 측정점의 부유균 평균 농도는 선택한 평가 기준에서 세균 농도에 관한 경계보다 낮아야 한다.

5.7.2 정적 테스트를 할 때 어떤 측정점의 부유균 평균 농도가 평가 기준을 초과하면 두 번 다시 샘플을 채취하고 두 번의 테스트 결과가 모두 합격해야 부합한다고 판정할 수 있다.

5.8 일상적인 모니터링

부유균의 감시에 있어서 편향조정한도와 경계한도가 단일방향을 따라 평행류선을 그리고 기류방향과 수직인 단면상풍속의 기류를 설정하여 무균실의 미생물농도가 통제되도록 보장하는것이 좋다.정기적으로 미생물 부하와 소독제의 효력을 검사해야 하며, 경향 분석을 하는 것이 아니다.정적 및 동적 모니터링은 모두 이 방법을 사용할 수 있습니다.

플랑크톤균의 샘플링 빈도에 대해 다음과 같은 상황이 발생하면 수정을 고려하고 다음과 같은 상황을 평가할 때 다른 항목의 검사 빈도를 확정해야 한다.

--------------- 연속적으로 편향 조정과 경계 한도를 초과하였다.

-------------- 휴업 기간이 예상보다 연장됐다.

-------------- 생산 기간에 공기 정화 시스템은 어떠한 중대한 수리를 진행한다.

-------------- 경향성을 나타내는 데이터를 기록하는 것을 자주 한다.

소독 규정의 변경;

생물오염 등

------------ 생산설비에 중대한 수리가 있거나 설비가 추가된 경우.

------------ 무균실 구조구역의 분포에 중대한 변동이 있을 때.

절강소정정화설비유한공사절강성 소흥시 상우구 도허진에 위치해있으며 화동지역 정화설비업종중의 제조업체이다.ISO14644-1 표준, GB50073-2001 국가 표준 및 국가 GMP 규범 요구에 따라 마이크로 전자, 생물 의약, 병원 수술실, 광섬유 광케이블, 식품 음료, 정밀 기기, 반도체 및 신소재 응용 등 업종의 공기 정화 시스템 공정 설계, 시공, 검측 및 기술 서비스이다.
회사는 정화 작업대 시리즈, 풍림실 시리즈, 통풍 캐비닛 시리즈, 생물 안전 캐비닛 시리즈를 주로 경영한다의료위생, 전자, 제약, 생물, 식품, 농림, 목축수의사, 검사검역, 항공우주, 자동차제조, 정밀기기, 전문대학과 각 과학연구기구에 광범위하게 응용되여 동남아시아시장과 높은 명성을 갖고있다.
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