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2025 년 6 월 첫째 날, 볼티모어에서 열린 2025 년 ASMS 컨퍼런스에서 사이머페이는 Thermo Scientific으로 올해 신제품 시리즈를 발표했습니다.™ Orbitrap™ Excedion™ 프로는 차세대 2합일 초고해상도 스펙트럼으로 명명된 싸이머페이의 15년 휘황한 생산라인의 인수자가 됐다. QExactive (QE 시리즈) 와 Orbitrap Exploris (OE 시리즈) 에 이어 3세대 Ex 패밀리의 스타 제품으로 Ex 패밀리 workhorse의 절호의 사용자 경험을 이어받아 Exceed의 절호의 원망을 안겨줄 것으로 기대하고 있다.
그럼 이 편에서는 볼티모어의 바람을 따라 새로운 Thermo Scientific을 체험해 보도록 하겠습니다.™ Orbitrap™ Excedion™ 프로죠 ~
기기의 앞부분에서 더 높은 전송 효율과 불안정한 화합물에 대한 더 나은 표현을 위해 Orbitrap™ Excedion™ Pro의 프런트엔드는 OptaMax Plus 이온 소스를 교체했습니다. 작년에 출시된 차세대 싸이머페이 정량 제품 라인과 함께 고급스러운 제품인 Stellar입니다.™질량 스펙트럼과 함께 탑재된 발표 된 이온 소스 (Orbitrap도 작은 기대를 불러 봅시다™ Excedion™ Pro는 앞으로 정량 분야에서 활약할 것이다.) 더 높은 온도 범위 내에서 더 좋은 스프레이 안정성을 제공할 수 있다.아울러 불안정한 화합물이나 쉽게 변하는 코스메틱 펩타이드 세그먼트 등을 위해 특별히 설계된 오르비트랩 애스센드와 유사한 차세대 전기 이온 깔때기를 탑재해 보다 부드러운 프런트엔드 전송을 제공하고 원내 손실을 줄였다.두 개의 검이 합쳐져 서로 잘 어울린다.
또한 단백질 그룹학 사용자의 경우, 우리는 올해 완전히 새로운 나노 리터 이온 소스 OptiSpray를 추가로 발표하여 사용자에게 더욱 우수한 성능과 함께 더욱 간단하고 편리하며 안정적인 사용 경험을 제공할 것이다.또한 새로운 납승원구역은 교정, 직접 샘플링 등 여러가지 모식을 직접 지원할수 있다.
Orbitrap™ Excedion™ 프로는 혁신적인 eDR (enhanced Dynamic Range) 기술을 가져왔다. 간단히 말해서, 우리는 원래의 Full MS 스캔을 두 개의 하위 스캔으로 분할하여 이온이 더 잘 전송되고 누적되며 기상 수평 분리에 해당하는 효과를 얻을 수 있도록 했다. 결국 두 개의 하위 스캔은 소프트웨어를 통해 자동으로 결합되어 출력된다.eDR 기술은 저풍도 암이온의 신호 잡음비를 현저하게 개선하여 더 좋은 결과 신뢰도를 가져오고 기기 LOQs/LODs 성능을 향상시킬 것이다.이러한 1급 스펙트럼의 신호 증폭 작용은 단백질 그룹학의 1급 암이온의 민감도를 높이고 고풍도 단백질로 인한 감정에 대한 교란 상황을 개선한다.
단백질 그룹학의 정성과 정량 성능을 한층 더 향상시키기 위해, 우리는 기본적으로 DIA 채집 속도에 영향을 주지 않는 전제하에, 동시에 사용자에게 목표 폴리펩타이드에 대한 정량 능력을 제공할 수 있기를 희망한다. 이를 Hybrid-DIA 기술로 명명하고, Adaptive RT 기술과 결합한다. 아래 그림 실험에서 볼 수 있듯이, 30min 그라데이션 시간 내에 DIA 성능을 희생하지 않는 전제하에 450개의 목표 폴리펩타이드의 정량 62ammol 범위를 완성할 수 있다.
새로운 Orbitrap에서™ Excedion™ Pro에서 우리의 Orbitrap 검출기는 Bent Trap 사전 누적 기술과 함께 더 긴 유효 이온 주입 시간을 부여하는 진화를 맞이했습니다.동시에 Orbitrap의 스캔 속도가 70Hz에 이르렀기 때문에 Orbitrap은™ Excedion™ 프로는 짧은 사다리와 작은 샘플에서 더 좋은 모습을 보였다.그림에서 볼 수 있듯이, 9min의 초단거리 사다리에서 6ng에서 200ng의 샘플링에 이르기까지 Bent Trap 사전 누적 기술은 모두 상응하는 향상을 가져올 수 있으며, 더 낮은 샘플링 향상은 더욱 현저하다.
또한 TMT-32plex 및 TMT-35plex 샘플에 대한 새로운 Orbitrap™ Excedion™ Pro의 Phi-SDM 알고리즘은 또한 TurboTMT 45k 및 TurboTMT 60k의 알고리즘을 가져와 사용자가 정량적으로 보고된 이온의 베이스라인 분리를 보장할 것이다.
서로 다른 파열 방식은 실제 응용에서 매우 중요한 역할을 한다.기존의 이전 2세대 계측기에서 2합일 제품 라인은 HCD 파열(및 소스 내 CID) 모드만 제공하지만 새로운 Orbitrap에서는™ Excedion™ Pro에서는 EThcD 모드와 함께 EASY-Electron Transfer Dissociation(ETD)의 파열 방식을 제공합니다.간단히 말해서, 새로운 Orbitrap에서™ Excedion™ 프로에서 암이온은 IRM에 포획되어 여기서 안트라센 시약과 반응하면 생성된 ETD 파편이 C-Trap으로 다시 전달되며, 이때 우리는 EThcD를 위해 IRM에 계속 가속하거나 Orbitrap에 직접 들어가 검사할 수 있다.
실제 응용에서 생물 제약 분야 및 단백질 그룹학 분야, ETD 및 EThcD 모델은 광범위한 응용 장면을 가지고 있다.우리가 단백질 서열이나 폴리펩티드의 수식에 대해 더욱 정교한 표징을 해야 할 때, 우리는 서열 커버리지, 수식 위치 확증 정보에 대해 더욱 엄밀한 수요를 가지게 되는데, 이때 ETD 및 EThcD 모델은 우리의 강력한 조력자가 될 것이다.
우선, 완전한 당펩타이드와 같은 수식 감정에 직면할 때, EThcD의 파열 패턴은 우리에게 당사슬과 아미노산 사이의 연결을 보존하는 동시에 펩타이드 키를 파열할 수 있으며, 우리에게 수식 위치 정보 및 펩타이드 서열 정보를 동시에 제공할 수 있다.
또 다른 사례는 Top-down 또는 Middle-down 실험에서 유래한 것으로, 단일 HCD 모델에 비해 ETD 및 EThcD와 같은 다양한 파열 모델의 보너스는 우리에게 더 높은 서열 커버리지를 제공하며, 단백질 서열에 대한 우리의 정교한 표징에 유리하다.아래 그림에서 볼 수 있듯이, 특히 EThcD 모드에서는 단순 ETD 모드보다 더 높은 시퀀스 커버리지(53% vs 40%)를 얻을 수 있습니다.동시에 새로운 Orbitrap™ Excedion™ Pro의 mass range는 m/z 12000까지 확장할 수 있으므로 전체 단백질 또는 Top-down 검사의 이점을 누릴 수 있습니다.
커버리지 측면에서는 면역 펩타이드 그룹학과 같은 폴리펩타이드 수준의 감정과 같은 Top-down 또는 Middle-down과 같은 단백질 서열 커버리지 실험도 혜택을 볼 수 있습니다.
시퀀스 커버리지에 대한 도움 외에도 denovo나 peptide mapping과 같은 실험에서 우리는 종종 ETD의 파열 모드를 통해 확인할 수있는 I와 L의 분별 및 D와 isoD의 분별 등과 같은 특정 아미노산 시퀀스에 대한 확증이 필요합니다.
종합하면, 사이머페이의 올해 새로운 Orbitrap™ Excedion™ 더 빠른 스캔 속도, 더 나은 감도, 새로운 eDR 및 Hybrid-DIA 기술, ETD, EThcD 파열 모드 및 m/z 범위 확장 등의 개선을 가져온 Pro 스펙트럼™ Excedion™ Pro 질량분석기는 우리에게 더욱 효율적이고 빠르고 정확한 단백질정성정량을 가져다줄수 있으며 생물제약표징, Top-down 등 대분자실험에 더욱 우수한 실험결과를 가져다줄수 있다.