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ELISA(효소연면역흡착측정) 키트 원리유형 측정방법
날짜:2026-04-08읽기 :1

ELISA(효소연면역흡착측정) 키트의 원리는 주로 항원과 항체의 특이적 결합 및 효소의 촉매작용에 기초해 화학반응을 통해 바탕물을 발색시킨 뒤 색깔의 깊이에 따라 정성 또는 정량 분석을 한다.다음은 몇 가지 일반적인 ELISA 키트 원리 유형입니다.
쌍항체 협심법
원리: 항원에 대해 서로 다른 결정 클러스터를 사용하는 두 가지 항체를 사용하는데, 한 항체는 먼저 고상 캐리어 (예: 폴리스티렌 마이크로 공판) 표면에 포장되어 항원을 포획하는 데 사용되며, 포획 항체라고 한다.검사 대기 샘플을 넣으면 샘플의 항원이 고체 캐리어의 포획 항체 특이성과 결합됩니다.그리고 포획 항체에 이미 결합된 항원의 또 다른 표위와 결합하여"항체-항원-효소 표적 항체"의 면역 복합체를 형성하는 효소가 표시된 또 다른 항체를 첨가한다.마지막으로 효소의 바탕물을 첨가하면 효소가 바탕물을 촉매하여 화학반응을 일으켜 색갈변화를 일으키며 색갈의 깊이는 견본중의 항원의 함량과 정비례한다.
적용 범위: 단백질, 폴리펩티드 등 대분자 항원을 검사하는 데 자주 사용되며, 병원체 항원, 종양 표지물 검사 등 방면에서 광범위하게 응용된다.

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간접법
원리: 먼저 항원가방을 고상담체에 붙인후 검사를 기다리는 항체가 함유된 견본을 첨가하고 견본중의 항체와 고상담체의 항원특이성을 결합시킨다.결합하지 않은 물질을 세탁해 제거한 뒤 효소 표시된 항인 또는 항동물 면역글로불린을 넣은 2항, 2항은 이미 항원에 결합한 특이성 항체와 결합해'항원-항체-효소 표적 2항'의 복합체를 형성한다.바탕물을 첨가한후 효소는 바탕물의 발색을 촉매하는데 색갈의 깊이는 견본의 항체의 함량과 관련된다.
적용범위: 주로 인체의 혈청중의 병원체항체를 검사하여 상응한 병원체에 감염되였는가를 판단하거나 자체항체를 검사하여 자체면역성질병의 진단에 사용하는 등 여러가지 항체를 검사하는데 사용된다.
경쟁법
원리: 특이성 항원과 검사 대기 샘플의 항체를 이미 항체가 포장된 고상 캐리어에 동시에 첨가하고, 샘플의 항체와 효소 표적 항원은 고상 캐리어에 있는 항체를 경쟁적으로 결합한다.만약 샘플에 항체 함량이 높다면 고체 항체와 결합할 기회가 크고 효소 표적 항원이 결합할 기회가 적다;반대로 샘플에 항체 함량이 낮으면 효소 표적 항원이 고체 항체에 결합할 기회가 많다.세탁 후 바탕물을 넣으면 효소표시 항원과 고상항체가 결합될수록 효소촉매 바탕물의 발색이 짙어지고 샘플의 항체 함량과 색깔의 깊이는 반비례 관계를 보인다.
적용 범위: 약물 잔류, 호르몬 등 소분자 항원 또는 반항원 검사에 적용되며, 항체 효가가 낮은 샘플을 검사하는 데도 사용할 수 있다.
항원경쟁법
원리: 먼저 특이성 항체 패키지를 고상 캐리어에 배치하고, 검사 대기 샘플과 일정량의 효소 표적 항원을 첨가하며, 샘플 중의 항원과 효소 표적 항원 경쟁을 고상 캐리어의 항체와 결합한다.세척을 거친후 바탕물을 첨가하여 발색반응을 진행하면 견본중의 항원함량이 높을수록 고상항체와 결합된 효소표시항원이 적어지고 색갈이 옅어진다. 즉 견본중의 항원함량과 색갈의 깊이가 반비례한다.
적용 범위: 농약 잔류, 동물용 약 잔류 등과 같은 소분자 항원 물질을 검출하는 데 자주 사용됩니다.