실리카겔 H판 박층층석판 (Silicagel Hthin-layerchromatographyplate, 약칭 TLC판) 은 화학, 약학 등 분야에 널리 응용되고 부동한 물질의 성분을 분리하고 분석하는데 사용되는 흔히 사용하는 분석도구이다.박층층분석법(TLC)은 고정상과 유동상 사이의 물질 분배 차이에 기반한 분리기술이다.다음은 실리콘 H 판의 얇은 계층 분석 판 실험 방법의 기본 단계입니다.
재료 및 장비
실리콘 H 얇은 레이어링 판(SilicagelHTLCplate)
용제 시스템 (유동상, 일반적으로 용제 혼합물)
샘플 용액
스프레이 시약 (예: 암모니아수, 자외선 검사제 등)
개발 슬롯 (예: 유리 슬롯)
모세관 (샘플링용)
자외선 또는 기타 발색제 (예: 요오드 증기, 발색용)
이액관, 측량통 등
실험 절차
1. TLC 보드 준비
실리콘 H 보드를 절단하면 일반적으로 적합한 크기를 선택하며 일반적으로 2.5cm x 7.5cm의 작은 보드입니다.
연필을 사용하여 시작선 (일반적으로 판의 아래쪽에서 1-2cm) 을 가볍게 표시하십시오. 시작선은 샘플의 샘플을 표시하는 곳입니다.
2. 시료 용액 준비
분석을 기다리는 시료를 적당한 용매에 용해하면 농도는 일반적으로 1-5mg/mL 사이이다.용매제를 사용할 때는 유동상과의 호환성에 주의해야 한다.
3. 샘플링
모세관을 사용하여 시료 용액을 TLC 플레이트의 시작 선 위치에 조심스럽게 놓습니다.샘플을 찍을 때, 매번 샘플을 찍을 때마다 용제가 깨끗하게 휘발될 때까지 기다려야 하며, 샘플이 과다하게 나오지 않도록 해야 한다.
여러 샘플을 샘플링할 수 있지만 불완전한 분리를 피하기 위해 적당한 거리를 유지해야 합니다.
4. 개발조와 용제 준비
유리 발전조에 적당량의 유동상 (용제) 을 넣다.유동상의 선택은 목표 물질의 극성에 따라 선택해야 하며, 흔히 볼 수 있는 용제 시스템인 헥산, 에틸에스테르, 클로로포름, 메탄올 등 혼합물이다.
용매의 액면은 시료가 용매에 용해되지 않도록 TLC 판의 시작선보다 낮아야 한다.
5. 발전(분리)
시료가 칠해진 TLC 플레이트를 개발 슬롯에 수직으로 넣어 플레이트 바닥이 시료 점에 닿지 않고 용매에 스며들도록 합니다.
용매가 TLC 보드를 따라 올라가게 하고 샘플을 가지고 분리합니다.용제의 최전방이 대략판의 꼭대기까지 올라가면 발전을 멈춘다.
만약 필요하다면 응축장치를 사용하여 홈내의 용제증기를 유지하여 발전과정을 더욱 균일하게 할수 있다.
6. 꺼내고 건조하기
개발 슬롯에서 TLC 보드를 꺼내고 연필로 용매의 최전방 위치를 표시합니다.
TLC 패널을 공기 중에 배치하거나 건조기를 사용하여 용매가 완전히 휘발되는지 확인합니다.
7. 검사
시료에 자외선 흡수 특성이 있으면 직접 자외선 램프로 TLC 패널을 비춰 분리된 반점의 위치를 관찰할 수 있다.
샘플이 자외선 흡수성을 갖추지 못하면 발색 시약 스프레이 (예를 들어 암모니아수, 요오드 증기, 유황 함유 시약 등) 를 사용하여 발색 반응을 할 수 있다.
발색이나 자외선 등을 통해 관찰하면 서로 다른 반점을 볼 수 있으며, 반점의 이동 속도(Rf 값)는 물질을 식별하는 데 사용될 수 있다.
8. 분석 결과
각 분리된 반점의 Rf 값(반점 이동 거리/용매 최전방 이동 거리)을 측정하여 알려진 표준 물질의 Rf 값을 비교하여 분석합니다.
주의사항
용제의 선택: 서로 다른 물질에 따라 적합한 용제 시스템을 선택하여 좋은 분리 효과를 확보한다.
샘플의 양과 정밀도: 샘플의 양이 너무 많으면 안 되며, 샘플의 용해가 완전하지 않거나 반점이 너무 커서 분별하기 어려운 것을 피해야 한다.
발전조의 밀봉성: 발전조의 밀봉이 양호하고 용제의 증발이 너무 빠르지 않도록 확보한다.
실험 환경: 실험 과정에서 너무 많은 진동과 기류를 피하여 분리 효과에 영향을 주지 않도록 해야 한다.
이러한 단계를 통해 실리콘 H 패널로 얇은 계층 분석 실험을 수행하여 복잡한 샘플을 성공적으로 분리하고 분석 할 수 있습니다.