세포치료의 강호에서 급성수계백혈병 (AML) 은 줄곧 어려운 경골이였다.특히 재발하거나 치료하기 어려운 (rraML) 환자들은 일반 화학요법의 길이 점점 좁아지고 있는데, 서광인 조혈모세포이식 (HSCT) 을 바라면서 하필이면 환자에게'완화'상태로 선진화할 것을 요구하고 있다.

이것은 마치 죽음의 순환과 같다: 생명을 살리려면 이 배를"이식"해야 하지만, 배에 오르는 입장권은"완화"이고, 당신의 손에 있는"화학 요법"카드는 오히려 이 효과를 낼 수 없다.그래서 다른 혈액종양 분야에서 전공이 혁혁한'세포 킬러'인 CAR-T에 눈을 돌렸다.

01.이상은 풍만하다:"통용"사랑킬러 만들기

환자 자신의 T세포(자체 CAR-T)로 rramL을 직접 상대하는 것은 효과가 좋지 않았다.그 원인은 아주 간단하다. 다륜화학료법의"무차별 폭격"을 거쳐 환자의 체내의 T세포는 이미"지친 스승"으로서 전투력이 크게 떨어졌다.

그래서 더 좋은 아이디어는 건강한 기증자의 T세포로'즉취즉용'의 범용형 CAR-T (이체 CAR-T) 를 만드는 것이다.이것은 마치 예비역에서 장비가 우수하고 정력이 왕성한 특수부대를 직접 이동시키는 것과 같다.

그러나 이"고용군"은 두 가지 치명적인 문제가 있습니다.

(1) 적과 아군을 구분하지 않는다 (이식물항숙주병, GvHD): 그것은 환자의 건강조직을 공격할수 있다. 필경"원장"이 아니다.반드시 그것의 원생적인 T세포 수용체 (TCR) 를 제거해야 하는데, 그것의"고향 내비게이션 시스템"을 뜯어 함부로 뛰어다니지 않도록 하는 것과 같다.

(2) 아군에 의해 오상 (면역 배척): 환자 자신의 면역 체계는 이 외래 부대를 침입자로 간주하고 군중들이 일어나 공격한다.반드시 그것의 신분 표식인 HLA-I류 분자를 두드려야 하는데, 그것에"은신복"을 입혀 환자의"방어 시스템"이 그것을 볼 수 없게 하는 것과 같다.

자, 청사진이 있다: 우리는 건강한 T세포에 대해"마법개혁"을 진행해야 한다. 즉 TCR을 두드리고 HLA-I를 두드리며 AML세포를 식별할수 있는 CD33-CAR을 다시 두드려야 한다.

02.현실은 매우 뼈대있다: 세 가지 일은 어떻게 한 걸음 한 걸음 나아갈 수 있습니까?

이렇게 많은"개조지령"(두가지 유전자제거에 사용되는 CRISPR RNP, 한가지 두드리기에 사용되는 잠자는 미인전좌효소 mRNA와 CAR 유전자를 가진 느린 비루스DNA) 을 한번에 고효률적으로 귀한 T세포에 밀어넣는것은 거대한 공정도전이다.전통적인 바이러스 운반법은 절차가 복잡하고 비용이 많이 들고 주기가 길며 잠재적인 보안 위험도 수반한다.스위치를 누르는 것처럼 이'유전자 개조 호화 선물 꾸러미'를 한꺼번에 세포에 정확하게 배달할 수 있는 방법은 없을까?

03. MaxCyte 등장:"불가능"에서"원클릭으로 해결"

이것이 바로 이 응용보고에서 나바라대학에서 온 연구자들이 보여준 핵심가치이다.그들이 사용하는 MaxCyte GTx™ 유동식 전기 전염 플랫폼은 이"한 단계 배달"의 난제를 해결했다.그것은 비바이러스 방식으로 한 번의 전기 충격 조작에서 두 종류의 크리스퍼 RNP, 잠자는 미인 좌석 전환 효소 mRNA, CD33-CAR 좌석 전환 minicircle DNA 등 네 가지 기능이 각기 다른 생물 대분자를 동시에 T세포에 성공적으로 도입했다.

"빠르고, 정확하고, 독하다"고 할 수 있는 이 작업의 가치는 다음과 같습니다.

• 단순하고 효율적: 전체 유전자 공학의 핵심 단계가 한 번의 전기 회전으로 단순화되어 제조 시간이 크게 단축됩니다.수치가 보여준데 따르면 개조를 거쳐 평균 32.4% 의 CD33-CAR 양성세포를 얻을수 있으며 69% 가 넘는 세포가 이중유전자제거에 성공했다.

• 세포 친화적: 이런"물리적 파문"방식은 난폭해 보이지만 실제로는 부드럽다.개조된 CAR-T 세포는 여전히 왕성한 증식 능력과 이상적인 세포 표형을 유지하고 있으며, 이'전기 충격 요법'으로 인해 원기가 크게 다치지 않아 전투력이 조금도 줄어들지 않고 있다.

• 강력한 기능: 체외 세포 독성 실험이나 생쥐 모델에서의 체내 항종양 활성 테스트, 이러한"한 걸음 내디딘"CD33-AlloCART 세포는 전통적인 방법 제조 세포와 일치하는, 강력한 종양 살상 효과를 나타냅니다.

• 원활한 확대: 가장 중요한 점은 이 기술이양호의 scalability (확장성) 입니다.2x10 ⁶세포의 소시규모나 5x10 ⁷세포의 림상관련 생산규모나 세포의 개조효률, 표형과 기능은 모두 고도로 일치하다.이것은 이 기술이 실험실에서 임상으로 나아가고 상업화 생산을 실현하는 길이 원활하다는 것을 의미한다.결국 5x10 ⁷의 시작 세포는 3x10 ⁸를 초과하는 순화 후 CAR-T 제품을 수확 할 수 있습니다.

04. 요약: MaxCyte 선택, 효율성 선택

rraml이라는 완고한 적에 직면하여 과학자들은 정밀한"범용형"CAR-T 세포를 설계해냈다요법.그리고 MaxCyte의 전기 전염 기술은 이 신병의 이기를 단조하는 관건적인"지조 플랫폼"이 되었다.그것은 비바이러스, 한 단계, 규모화 가능한 방법으로 복잡한 세포 공학 배달 난제를 해결하여"즉시 사용 가능한"CAR-T 치료법을 현실에 한 걸음 더 가깝게 만들었다.

이는 한 기술에 대한 검증일 뿐만 아니라 곤경에 허덕이는 AML 환자들에게 새로운 희망의 등불을 켜주는 것이다.

* 이 글은"탁푸바이오"위챗 대중번호, 저자: 우문수학

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▍MaxCyte 정보:

1999년 설립된 MaxCyte는 미국 메릴랜드주에 본사를 둔 세포공학 전기 천공 기술 솔루션 공급업체다.ExPERT 활용™전기 전환 플랫폼은 대규모 세포의 공정화 처리를 효율적이고 안정적으로 실현할 수 있으며, 초기 연구, 임상 개발에서 상업화 생산에 이르는 전 단계의 세포 전염 수요를 만족시킬 수 있으며, 항체 단백질 표현, 백신 개발, 유전자 편집 및 세포와 유전자 치료 등 분야에 광범위하게 서비스된다.MaxCyte 중국 남구 총세대로서 상하이 하오 확장은 당신이 연구 개발, 임상에서 상업화 생산에 이르는 다양한 단계에서 당신의 세포 전염량 수요를 만족시키는 전문적인 솔루션과 기술 지원을 제공할 것입니다.

▍상해 호확에 관하여:

상해호확대과학기자재유한회사는 2019년에 설립되였는데 본사는 상해에 위치해있으며 실험실설비/소모품 및 분석기구의 전문서비스업체이다.회사는 생물, 의약, 물성검측, 화학공업분석, 식품, 공업생산 등 관련 분야의 고객에게 국내외 하이테크 전문설비 및 기술자문서비스를 제공하는데 주력한다.