장비 준비: CO₂ 로터 전원, 가스 공급원 (CO₂ 강병) 연결이 정상적인지 확인하고 CO₂ 감압 밸브의 압력이 안정적인지 확인합니다 (보통 0.1~0.2 MPa).설비의 전원을 켜고 설정온도 (예: 37 ℃) 로 예열하며 배양함 안의 물판을 예열하여 습도를 유지한다.

매개변수 설정: 세포 요구에 따라 CO₂ 농도 (일반 5%) 를 설정하고 적외선 또는 열전도 센서를 통해 교정합니다.온도범위를 일반적으로 실온에서 50 ℃ 로 설정하려면 미리 예열하여 온도파동을 피해야 한다.배양용기에 따라 회전속도(50∼300rpm)와 진폭(통상 5∼50mm)을 조정해 액체가 튀지 않도록 한다.물판에 무균 증류수를 넣어 ≥95% 습도를 유지한다.

샘플 배치: 용기는 CO₂ 일출과 오염을 방지하기 위해 통기 뚜껑을 사용하거나 병뚜껑을 조이는 등 밀봉해야 합니다.무게 중심 오프셋이 로터 작동에 영향을 주지 않도록 샘플을 균형 있게 배치합니다.

운행 모니터링: 정기적으로 CO₂ 농도, 온도가 안정적인지 확인하고 운행 매개변수를 기록한다;통기 뚜껑 배양병이나 밀폐병을 사용할 때는 CO₂ 침투율의 균형을 맞춰야 한다.

작업 종료: CO가스 공급원을 끄고 농도가 0% 로 떨어진 후 전원을 끄고 센서 손상을 피합니다.물판과 강체를 깨끗이 청소하여 미생물의 자생을 방지하다.

2. 세포배양 모범사례 지침

세포 유형 및 배양기 선택: DMEM은 빠르게 증식하는 세포계에 적합하고 MEM은 다양한 세포 유형에 적용되는 등 세포 유형에 따라 적합한 배양기를 선택한다.원대 세포는 특수 생장 인자를 첨가해야 한다.

세포소생과 동존: 소생시 세포를 빠르게 해동하여 얼음결정 손상을 감소시킨다;냉동 보관 시 냉동 보호제 (예: 10% DMSO) 를 첨가하여 -80 ℃ 로 천천히 냉각한 후 액체 질소로 옮깁니다.

무균 조작: 모든 조작은 초정화 작업대 안에서 진행되며 실험복, 장갑, 마스크와 모자를 착용한다;조작 구역에서 말하고 기침을 피하고 미생물이 공기를 통해 전파될 위험을 줄인다.

정기적인 관찰과 기록: 정기적으로 현미경 아래에서 세포의 생장 상황을 관찰하는데, 세포 형태, 생장 밀도와 오염 유무 등을 포함한다;관련 데이터를 기록하여 적시에 이상을 발견하고 처리할 수 있습니다.

장치 유지 보수 및 교정: CO₂ 센서를 정기적으로 교정 (6 개월마다 한 번), 필터를 교체 (있는 경우);청결할 때 전기가 끊어져 액체가 회로 시스템에 들어가는 것을 피한다.