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ultra 액상 크로마토그래피 기둥 재생 방법
날짜:2025-12-23읽기 :0
1. 재생성 전 준비
  ultra 액상 크로마토그래피 기둥시약 준비: 초순수, 메탄올, 아크릴, 이소프로필알코올 등 크로마토그래피급 용제 및 적합한 폐액 수집병을 준비한다;액상 크로마토그래프의 펌프체, 샘플링 밸브가 누출되지 않도록 확보한다.
크로마토그래피 기둥 검사: 재생 전에 크로마토그래피 기둥의 현재 기둥 효과, 피크 데이터를 기록하고, 만약 기둥 안에 오염물 잔류가 강하게 남아 있다면, 먼저 크로마토그래피 기둥이 재생 가치가 있는지 평가해야 한다.
안전 조작: 조작 시 장갑, 고글을 착용하여 유기용제가 피부에 닿지 않도록 한다;실험실의 통풍이 잘 되도록 보장하다.
2. 유니버설 재생성 단계 (반상 크로마토그래피 기둥 위주)
세척 유동상 잔류
크로마토그래피 기둥을 떼어내고 초순수로 저유속(0.2~0.3mL/min)으로 30~60분간 씻어 완충염 등 수용성 불순물을 제거하고 염류에서 막힌 충전재가 석출되는 것을 방지한다.
만약 유동상에 이온이 함유된 시약의 경우, 50% 메탄올 수용액으로 1~2시간 씻은 후 순수 메탄올로 전환해야 한다.
강소수성 오염물을 제거하다.
크로마토그래피 기둥을 메탄올 100%, 아크릴 100%로 차례로 씻어내고 유속은 0.3-0.5mL/min을 유지하며 각 용제의 씻어내는 부피는 기둥 부피의 20~30배이다.
만약 오염물이 완고하다면, 이소프로필알코올로 씻을 수 있다 (이소프로필알코올은 점도가 높기 때문에 유속을 낮추어 기둥의 압력이 너무 높은 것을 방지해야 한다), 씻은 후 메탄올로 이행한다.
극성 오염물 세척
극성 불순물을 함유한 크로마토그래피 기둥의 경우 메탄올-물(1:1) 혼합액으로 60분 동안 씻은 뒤 순수 메탄올로 기선이 안정될 때까지 씻는다.
재생성 후 밸런싱
목표 분석 방법의 유동 균형 크로마토그래피 기둥으로 균형 부피가 기둥 부피의 10배 이상이어야 하며, 기준선이 안정된 후에 샘플 분석을 진행한다.
3. 특수 유형 크로마토그래피 기둥 재생성 주의사항
정상 크로마토그래피 기둥: 수용제를 함유한 세척을 금지하고, 재생 시 순서대로 헥사, 디클로로메탄, 에틸렌에스테르로 세척하고, 마지막에는 헥사로 균형 있게 보존한다.
이온교환크로마토그래피기둥: 먼저 pH값에 대응하는 완충용액으로 씻은 다음 이온제거수로 중성까지 씻은 다음 마지막에 5% 메탄올을 함유한 완충액으로 보존한다.
핸드 크로마토그래피 기둥: 공장에서 추천한 재생 용제를 우선적으로 사용하고, 강극성 용제를 사용하지 않으며, 핸드 고정상 파괴를 방지한다.
4. 재생성 후 검증 및 저장
성능 검증:ultra 액상 크로마토그래피 기둥재생이 완료되면 표준품을 주입하여 주효, 봉대칭성을 테스트하고 봉형이 개선되고 주효가 원래 수준의 80% 이상으로 회복되면 재생에 성공했음을 설명한다.
장기보존: 반상크로마토그래피기둥은 순메탄올로 밀봉보존하고 정상크로마토그래피기둥은 정기탄으로 보존하며 량끝은 막힌 머리를 단단히 조이고 상온, 피광환경에 놓아야 한다.