쥐 피암기의 실험 방법
실험 준비
환경 숙지: 실험 전 2 천사 생쥐는 실험실 환경에 익숙하고 자유롭게 음식을 먹고 물을 섭취합니다.
그룹별 설계: 그룹별 랜덤 구역 설계로 각 그룹 동물의 평균 체중과 성비를 비슷하게 한다.실험 생쥐는 훈련 방법에 따라 1회 적응 1회 전기충격(MOS), 1회 적응 한시훈련(MOL), 복수 적응 한시훈련(MUL) 3조로 나뉘었고, 각 조는 투여에 따라 대조(C)와 모형(M) 두 아조로 나뉘었으며, 마지막에는 총 6조(각 조 n=9)였다.
계기설치: 피암기는 명, 암 두 방으로 나뉘는데 그사이에 직경이 3센치메터인 동그란 구멍이 있고 두 방의 밑부분은 모두 동울타리로 깔려있다.암실 하단의 구리 울타리는 전기가 통하고 전압은 버튼을 통해 조절되며 일반적으로 40V, 50Hz이다.
훈련 방법
MOS법: 훈련은 하루내에 완성된다. 먼저 쥐를 피암기에 넣어 환경에 적응시킨다. 훈련할 때 쥐를 등구멍에 대고 명실내에 넣으면 암실에 들어가 전기충격을 받으면 꺼낸다.
MOL법: 훈련은 하루내에 완성되며 쥐는 환경에 적응하여 3min, 훈련은 3min이다.
MUL 법: 3일 연속 같은 시간에 쥐를 피암기에 넣어 3min에 적응하고, 3일 적응이 완료되면 훈련을 시작하여 3min 후에 꺼낸다.환경 적응과 훈련 당시 생쥐는 명실과 암실 사이를 자유롭게 오가며 잠복기가 3min 이상인 사람은 버리고 사용하지 않았다.
테스트 방법
기록지표: 훈련 완료 24h 후 생쥐를 다시 명실에 넣어 암실에 처음 진입하는 데 걸리는 시간, 즉 잠복기(STL)와 5min 이내에 암실에 진입하는 횟수, 즉 오류 횟수(ETs)를 기록한다.5min 내 생쥐가 암실에 들어가지 않으면 STL은 300s, ETs는 0으로 기록된다.
주의사항
실험 환경
환경청소: 실험전후에 울타리를 클릭하는 동물의 배설물을 정리하는데 주의를 돌리면 배설물이 통전성에 영향을 준다.알코올을 통해 닦고 말려서 가능한 한 이전 동물의 냄새를 제거하려면 기기 설비가 통풍 시스템을 갖추어야 한다.
간섭 감소: 실험 과정에서 소음 차단, 냄새 자극 감소, 광선 조절 등 모든 실험 절차가 일치해야 하며, 실험 환경은 조용하고 어두워야 하며, 가능한 한 가볍게 동물을 잡고 동물에 대한 자극을 줄여야 한다.두 상자 사이의 문을 닫을 때는 가볍고 부드러워야 하며, 너무 많은 외부의 소리를 만들어 동물의 행동에 영향을 주지 말아야 한다.
실험 조작
동물 적응: 실험이 시작되기 3~7일 전, 매일 동물을 잡고, 가볍게 어루만지며, 그것이 실험자에게 잡히는 것에 적응하도록 하고, 실험 과정에서 실험자가 잡아서 동물이 스트레스 상태에 처하게 되어 실험 결과가 신뢰할 수 없는 문제를 초래하지 않도록 한다.
전기 충격 매개 변수: 쥐 전류는 0.65-1.8mA (0.8mA 권장), 또는 전압 65-70V, 쥐 전류는 0.15-0.6mA (0.25mA 권장), 또는 전압 30-36V, 주파수는 5-15Hz 전류입니다.
설비 유지보수: 실험기기 밑부분의 구리 울타리는 녹이 슬기 쉬워 저항이 증가하므로 매번 실험하기 전에 사포로 매끄럽게 다듬어야 한다.