-
이메일
gptchina@gyrosproteintech.com
-
전화
13764581292
-
주소
상해시 서회구 풍림로 380호 A좌 1609-1613호
Mesa Labs
다채널 폴리펩티드 합성기 조력 알츠하이머 약물 개발
날짜:2025-01-08읽기 :0
사람 베타-아밀로이드 1-42 (그림 1) 는 알츠하이머 (AD) 환자의 뇌 퇴적 플라크의 주요 성분이다.AD 병리학, 진단 도구 및 잠재적 인 약물에 대한 일상적인 연구는 베타 아밀로이드 단백질을 중단 없이 공급해야합니다.그러나 C 말단의 높은 소수성과 서열의 사전 퇴적으로 인한 수지의 집합으로 인해 베타-아밀로이드 단백질(1-42)은 전통적인 고상폴리펩타이드 합성(SPPS)을 통해 제조하기 어려운 것으로 알려졌다.베타-아밀로이드 자동 합성의 최신 진전에는 적외선 가열과 새로운 우연 시약 조합이 포함되어 있으며, 더 짧은 순환 시간으로 난치 소수 펩타이드를 더 잘 합성할 수 있다.이 글은 Symphony에 있습니다.®X 24 채널 폴리펩티드 합성기는 서로 다른 합성 방법에서 베타-아밀로이드 단백질의 합성 효율을 평행으로 탐색했다.
Rink Amide ChemMatrix 사용™ (0.47 mmol/g) 및 R TentaGel™수지(0.19 mmol/g), PurePep™시약: HDMA/OxymaPure™또는 HDMC/OxymaPure 및 DIPEA 및 사전 설치된 Fmoc 아미노산 (1:1:1:2), Symphony®X 합성기에서 10배 과량, 규모 50 µmol의 조건으로 폴리펩타이드를 합성합니다.두 가지 합성 방법을 테스트했습니다.
방법 A:보호 해제 2 x 3 min, 짝짓기 2 x 5 min, 25 °C.
방법 B:탈보호 2 x 30 s, 90 °C, 짝짓기 2 x 1 min, 90 °C, 적외선 가열.
Symphony X 폴리펩티드 합성기는 5 가지 독립적 인 베타 아밀로이드 합성 조건을 동시에 테스트 할 수있는 유연한 기능을 제공합니다.HDMA(표 1)와 HDMC(표 2)는 각각 OxymaPure 시약과 조합해 Rink ChemMatrix 또는 R TentaGel 수지를 사용하고, 느린 방법 A로 베타-아밀로이드 단백질을 합성해 조미료의 순도가 비슷하다.최고 순도는 HDMA/OxymaPure 시약과 Rink Amide ChemMatrix 수지의 조합에서 나온다 (그림 2).
온도 상승(90°C) 및 반응 가속화(방법 B) 후 HDMA/OxymaPure/DIPEA 시약과 Rink Amide ChemMatrix 수지를 배합한 조제품 순도는 33.9% 였다.가속 방법 + 고온 + HDMA 조합의 합성 순도는 느린 방법 (표 1) 과 비슷합니다.
표 1.HDMA/OxymaPure/DIPEA 시약을 사용하여 방법A에 따라 베타-아밀로이드 단백질을 합성하여 조제품의 순도와 생산률을 얻는다.
표 2.HDMC/OxymaPure/DIPEA 시약을 사용하여 방법A에 따라 베타-아밀로이드 단백질을 합성하여 조제품의 순도와 생산률을 얻는다.
12 - ß- 아밀로이드 - 4.940
분
1
Symphony X 폴리펩타이드 합성기를 사용하여 24h (상온) 또는 17h (90 ℃) 내에서 24 가지 합성 조건을 동시에 측정하고 기기에서 자동 펩타이드 체인 절단을 완료 할 수 있습니다.
2
6가지 부동한 합성조건 (온도, 수지와 우연시약조합) 을 평가하여 소수펩타이드의 순도와 생산률의 가장 좋은 합성조건을 초보적으로 확정하였다.
3
새로운 폴리펩타이드 시약 HDMA를 사용하여 빠른 방법과 적외선 가열(90°C)을 통해 Symphony X 폴리펩타이드 합성기에서 베타-아밀로이드 단백질(1-42)-NH 합성에 성공했습니다.2
4
이를 바탕으로 소수 장사슬 펩타이드 (예: 베타-아밀로이드 단백질) 합성을 더욱 최적화할 수 있는데, 이는 짝짓기 시간을 단축하고 새로운 짝짓기 시약 조합으로 바꾸는 것을 포함한다
