1. 일상적인 조작규범
시약 준비 및 검사
시약병 (예: 아크릴, 활화제, 산화제) 의 밀봉이 양호하고 아르곤가스의 압력을 안정적으로 유지하여 외부 공기가 유입되어 합성 효과에 영향을 주는 것을 방지한다.
합성 전에 시약 여유량을 검사하고, 즉시 빈 병을 교체하여 시약 부족으로 합성이 중단되지 않도록 한다.
시퀀스 입력 및 매개변수 설정
컴퓨터 보조 설계 소프트웨어를 통해 대상 DNA 시퀀스를 입력하고 암호 하위 선호도, 2 단계 구조 및 제한 효소 위치를 고려합니다.
보호되지 않음, 결합, 닫힘, 산화와 같은 작성 단계가 올바른지 확인하고 나중에 순화하기 위해 TritylOnAuto 5'-DMT 기단을 유지하는 것과 같은 종료 방법을 선택합니다.
작성 프로세스 모니터링
시작 전에 StartColumn 단계를 실행하여 작성 기둥의 위치가 올바른지 확인합니다.
합성 중 전도 유동 풀을 통해 DMT 양이온 방출량을 모니터링하고 반응 진도를 판단한다.
정기적으로 온도, 압력 등의 파라미터가 정상 범위 내에 있는지 검사한다.
산물 처리
합성이 완료되면 고체 캐리어에서 산물을 절단하고 OPC, PAGE 또는 HPLC 순화로 짧은 조각과 소금 이온을 제거합니다.
순화 후 산물은 분장하여 보존하고 반복적으로 얼지 않도록 한다.
2. 일상적인 유지 보수 요점
병마개 "O" 형 고리
한 달에 한 번 검사하고 매년 적어도 한 번 교체합니다.흰색 침전이 생기면 아크릴 면봉으로 세척한다.
교체 시 지혈 집게로 낡은 고리를 집어 플러그에 입자가 없는지 확인한 뒤 새 고리를 설치하고 압력 테스트를 한다.
액체 저장병과 파이프라인
액체 저장병을 청결하게 유지하고 아르곤 가스 압력 및 파이프라인 기밀성을 정기적으로 검사합니다.
합성 전에 새 시약으로 파이프를 세척하여 낡은 시약의 잔류 간섭 반응을 방지한다.
유로 밸브
한 달에 한 번씩 물에 15분간 끓인 뒤 메탄올 초음파로 세척해 막히지 않도록 한다.
계기 청결과 방진
매주 젖은 천으로 껍데기를 닦아 바람받이를 피한다.고감도 실험 후 15분간 반응창을 자외선으로 비추어 멸균한다.
장기간 사용하지 않을 때는 일주일에 1~2회, 매번 약 30분씩 가동하여 부품의 습기를 방지한다.
3. 자주 발생하는 문제 해결
합성 생산율이 낮다.
원인: 시약 실효, 파이프라인 누출, 합성기둥 위치 편차.
해결: 시약 교체, 파이프라인 기밀성 검사, 합성기둥 위치 재조정.
산물 순도 부족
이유: 잘못된 순화 방법, 잘못된 작성 단계.
해결: HPLC 순화 단계 추가와 같은 순화 조건을 최적화하여 작성 매개변수가 올바른지 확인합니다.
계기 경보 또는 중단
원인: 폐액병 과만, 전원 파동, 온도 이상.
해결: 폐액병을 비우고 안정된 전원을 사용하여 온도 센서가 고장났는지 확인합니다.
데이터 예외 (예: 전도 변동)
원인: 전도 탱크 오염, 시약 혼입 불순물.
해결: 전도 탱크를 세척하고 새 시약을 교체하고 다시 조정합니다.
4. 조작 주의사항
무균 환경: 유인물 합성은 오염에 민감하며, 조작 시 장갑을 착용하여 외부 DNA나 효소 오염을 피해야 한다.
시약 보존: 아크릴 등 용제는 빛을 피하여 보존해야 하고, 활화제와 산화제는 밀봉하여 습기를 방지해야 한다.
데이터 기록: 각 로트의 합성 시퀀스, 시약 로트 번호, 품질 검사 도표를 상세하게 기록하여 문제를 추적하기 편리하다.