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초여과 원심관의 정확한 사용 방법을 파악하는 것이 실험의 성공을 보장하는 관건이다
날짜:2025-12-01읽기 :1

초여과 원심관은 원심과 막 분리 기술을 일체화한 실험실 소모품으로 단백질 농축, 탈염, 완충액 치환, 핵산 순화 및 소분자 제거 등 생물화학 조작에 광범위하게 응용된다.그 핵심은 특정 절류 분자량의 초여과막을 내장하고 원심력 구동 샘플을 통해 필름 구멍을 통해 목표 분자의 효율적인 분리를 실현하는 것이다.그러나 잘못 조작하면 필름이 막히고 샘플이 손실되며 회수율이 낮고 심지어 파이프가 파열되기 쉽다.정확한 사용 방법을 파악하는 것이 실험의 성공을 보장하는 관건이다.


1. 사용 전 준비
분자량에 따라 정확하게 필름을 선택한다: 목표의 큰 분자는 MWCO의 2~3배보다 크고, 작은 분자의 불순물은 1/2MWCO보다 작아야 하며, 효과적인 차단과 투과를 확보해야 한다;
윤습막면 (필요시): 소수성막 (예: PVDF) 에 대해 먼저 소량의 완충액 또는 에탄올을 첨가하여 5분간 윤습한 다음 원심에서 제거하여 가스저항이 류속에 영향을 주지 않도록 한다.
관체의 완전성을 검사한다: 여과막에 파손이 없고 관뚜껑의 밀봉권이 완전하여 원심이 새지 않도록 확인한다.
2. 샘플 적재 규범
상부 샘플의 부피를 제어한다: 일반적으로 원심관 최대 용량의 75% (예: 15mL 튜브 샘플링 ≤ 11mL) 를 초과하지 않고 농축 공간을 남겨둔다;
사전 해명 처리: 입자나 세포 파편을 함유한 샘플은 먼저 저속 원심 (예: 3000 × g, 5min) 또는 여과하여 막공이 막히는 것을 방지해야 한다;
고점도 또는 고농도가 직접 샘플링되는 것을 피한다: 적당히 희석하여 초기 통량을 높일 수 있다.
3. 원심 매개변수 설정
참조 공장 추천 회전 속도: 보통 3000~5000 × g, 과속 엄금 (관벽에 표시된 최대 RCF 값 보기);
적당한 시간 설정: 단계별 원심 분리 (예: 매번 10-15분), 농축액 부피를 관찰하여 건막을 피한다;
저온 조작: 열 민감 단백질, 4 ℃ 냉동 원심 분리기를 사용하여 변성을 방지합니다.
4. 농축과 세척 조작 기교
완충액 치환: 약 100~200μL로 농축되었을 때, 등체적의 새로운 완충액을 첨가하여 혼합한 후 원심을 분리하고, 2~3회 반복하면 > 95% 소분자 불순물을 제거할 수 있다;
막이 마르지 않도록 한다: 농축 종점은 최소 50 μL의 액체를 보존하고 건막은 회수율을 되돌릴 수 없습니다.
가볍고 부드럽고 균일하다: 이액기로 천천히 불어서 격렬한 진동으로 대분자를 손상시키지 마라.
5. 재활용 및 청소 (재사용 가능한 경우)
대부분의 초여과 원심관은 일회용 설계이지만 일부 모델은 재사용이 가능합니다.
사용 후 즉시 이온제거수로 헹구고 0.1MNaOH 또는 전용 세척액에 담가 잔류를 제거한다.
고압 멸균 또는 건조를 엄금하여 막 구조가 변형되지 않도록 한다.