젤라틴 이미징 시스템은 광학 이미징과 소프트웨어 분석을 결합하여 분자량 정밀 정량 및 농도 분석을 실현할 수 있으며, 그 핵심 프로세스와 기술 요점은 다음과 같다.

1. 분자량 정밀정량 원리와 절차

표준 커브 구성

시스템은 알려진 분자량의 DNAMarker 스트라이프를 참조로 사용하여 소프트웨어를 통해 위치를 표시하고 분자량-마이그레이션 거리의 의합 커브를 생성합니다.이 곡선은 전기 수영에서 분자량과 이동률의 선형 관계를 바탕으로 알 수 없는 스트라이프 분자량 계산의 정확성을 확보한다.예를 들어, DNA 필름에 Marker 스트라이프의 분자량 (예: 100bp, 500bp, 1000bp) 이 표시되면 시스템은 자동으로 곡선을 맞추어 후속 미지의 스트라이프의 분자량 추산에 사용됩니다.

알 수 없는 스트라이프 분자량 계산

측정할 샘플의 전기 수영 후 젤을 이미징 시스템에 배치하고, 자외선 또는 가시 광원을 통해 형광 (예: EB 염색) 을 자극하며, 소프트웨어는 이미지를 포착한 후 알 수 없는 스트랩이 젤에서 이동하는 위치에 따라 표준 곡선과 결합하여 그 분자량을 계산한다.이 방법은 육안 추정보다 정확하며 오차는 ±5% 이내로 조절할 수 있다.

2. 농도 정밀 정량 방법

밀도 측정 및 대비

시스템은 먼저 알려진 농도의 표준 스트립 (예: DNA 필름의 어떤 스트립의 DNA 함량) 을 표시한 다음 소프트웨어를 통해 알 수 없는 스트립을 클릭하여 표준 스트립과의 밀도 차이를 비교하고 알 수 없는 샘플 농도를 계산합니다.예를 들어, 표준 스트라이프 밀도가 100 단위이고 대응 농도가 50ng/μL이며 알 수 없는 스트라이프 밀도가 50 단위이면 농도는 약 25ng/μL입니다.

광밀도 선형 관계

시료의 빛에 대한 흡수량은 농도나 질량과 선형 관계를 보인다.시스템은 스트라이프의 광밀도(그레이스케일 값 또는 형광 강도)를 측정하고 표준 곡선이나 알려진 샘플 데이터를 결합해 미지의 샘플 농도를 추산한다.이 방법은 DNA, RNA 및 단백질 젤 (예: PAGE 젤) 의 농도 측정에 적용됩니다.

3. 핵심 기술 보장

광학 시스템 최적화

자외선 투사 광원 또는 백색 투사 광원을 사용하여 균일한 광원 분포를 보장하고 불균일한 광밀도가 결과에 미치는 영향을 줄입니다.고해상도 CCD 또는 디지털 카메라는 이미지를 캡처하고 다크 박스 디자인과 결합하여 외부 광원 간섭을 차단하여 이미지 품질을 향상시킵니다.

소프트웨어 분석 기능

소프트웨어는 배경 공제, 스트라이프 분할, 밀도 스캔 등의 작업을 지원하며, 세로 스캔 그래프와 포인트를 생성하여 정확한 정량을 실현할 수 있다.예를 들어, PCR 정량에서 소프트웨어는 전체 스트라이프에서 각 스트라이프의 상대 백분율을 계산하고 밀도 스캔은 스트라이프 그레이스케일 값의 세로 분포 곡선을 생성합니다.

4. 응용 장면과 장점

분자생물학 연구: DNA/RNA 분자량 및 농도를 정확하게 측정하고 유전자 복제, 서열 분석 검증을 보조한다.

단백질 공학: 단백질 표현 산물의 비율을 정량 분석하고 발효 공정을 최적화한다.

약물개발: 농도측정을 통해 약물순도를 평가하고 품질통제를 확보한다.

이 시스템은 표준화된 프로세스와 첨단 기술을 통해 분자량과 농도의 이중 정밀량을 실현하여 생명과학 연구에 신뢰할 수 있는 데이터 지원을 제공한다.