역방향 크로마토그래피 기둥은 사용 중에 여러 가지 오류가 발생할 수 있습니다. 다음은 이러한 오류에 대한 해결책입니다.
1. 압력 이상 상승
1. 체판이 막히다
- 표현: 주압이 현저하게 상승하거나 파동한다.
- 해결: 체판을 떼어내고 희질산 10%에 넣어 초음파 10분간 세척하고 순수한 물은 씻어 다시 설치한다.강용제를 사용하여 역방향 세척할 수도 있다.정방향 고압 충격을 피하도록 주의해라.
2. 충전재 오염
- 표현: 실린더 충전재가 강한 보존물질로 덮여 있어 실린더 효과가 떨어진다.
- 해결: 기둥 이음매를 비틀어 표층 오염 충전재를 파내어 새 충전재로 교체하고 단단히 다진다.이 메서드는 부분적으로 원통형 효과를 복원하지만 새 원통형 수준에는 도달하지 못합니다.
3. 소금 결정 석출
- 표현: 유동에 고농도 유기용매가 함유되어 있을 때 완충염 결정이 유로를 막는다.
- 해결: 염류를 저농도 메탄올/수용해한 후 고농도 유기농 현상으로 전환합니다.
2. 분리효과 감소
1.피크 이상
- 드래그 / 포크: 실린더 헤드가 내려앉거나 죽은 크기로 인해 같은 모델의 충전재를 보충하고 평평하게 눌러야 합니다.금속이 오염되면 순도 높은 실리콘 기둥으로 바꾼다.
- 귀봉: 잔류오염물질이 고온에서 흘러나와 종온을 높여 크로마토그래피 기둥을 구워 제거할 수 있다.
2. 기둥 효과 감소
- 원인: 고정상 유실 또는 실리콘 용해.
- 해결: 유동상 pH(권장 2~9)를 최적화하여 알칼리성 조건 가속 결합상 수해를 피한다.
3. 보존 시간 표류
1. 밸런스 부족: 유동상 교체 후 최소 10~20배 기둥 부피 밸런스를 통입한다.
2.소수 붕괴: C18기둥은 장기간 용수로 운행하면 공극이 수축되므로 5% 를 주입하여 유기적으로 회복해야 한다.
4. 예방 유지 관리 전략
1. 조작 절차를 규범화하다
- 급격한 압력 변화를 피하려면 개폐 밸브가 느려져야 합니다.
- 흐름 전환은 경도 전환이 필요하며 유기에서 순수상으로 직접 전환하는 것을 금지합니다.
2. 정기적으로 심층 세척
- 일반 세척: 물 95% -5% 메탄올 → 순수 메탄올 → 이소프로필알코올 세척, 각 용매 최소 10배 기둥 부피
- 고질적인 오염물: 단백질 잔류는 DMSO를 선택하고 전분류는 물로 씻어낸다.
3. 스토리지 최적화
- 장기간 사용하지 않을 때, 기둥에 메탄올이나 아크릴이 가득 차서, 이음매를 꽉 조여 건조를 방지한다 [^2^].체류 금지 완충액 하룻밤.
역방향 크로마토그래피 기둥 고장 해결은 물리적 세척, 화학 재생 및 조작 규범을 결합해야 한다.기기가 막히는 등 비주원적인 요소를 우선적으로 배제하고 크로마토그래피 기둥 자체의 문제를 목적성 있게 처리한다.전체 유지 관리 로그를 작성하여 매번 세척 조건, 압력 변화 및 테스트 결과를 기록하면 기둥의 사용 수명을 현저하게 연장할 수 있다.