Waters 크로마토그래피 기둥사용 시 고려할 사항은 다음과 같습니다.

1. 설치 및 연결:

흐름 ID:

크로마토그래피 기둥은 일반적으로 방향 화살표가 표시되어 있으므로 화살표 방향으로 정확하게 설치하여 반동을 피해야 합니다.

배관을 연결하려면 크로마토그래피 기둥 이음매와 일치해야 하며, 일치하지 않아 기둥 효과가 떨어지거나 새지 않도록 해야 한다.

초기 현상:

새 크로마토그래피 기둥을 설치하기 전에 아크릴이나 메탄올과 같은 순수한 유기용제를 사용하여 낮은 유속 (0.1 mL/min) 세척, 다시 일반 분석 유속으로 점진적으로 유속을 높여 기둥 내 불순물을 제거하고 기포가 검사 시스템에 들어가지 않도록 합니다.

2. 흐름과 균형

흐름 호환성:

유동상을 교체하기 전에 새로운 유동상이 크로마토그래피 기둥 내의 현재 용제와 호환되는지 확인해야 한다.만약 유동에 완충염이 함유되어 있다면, 먼저 사용해야 한다5배 기둥 부피의 물/유기용제 혼합액을 씻어 완충 유동상을 도입한다.

유동상 중 소금 농도가 너무 높을 때 고비례 유기상을 직접 사용하지 않도록 하여 염분이 분출되어 크로마토그래피 기둥이 막히는 것을 방지한다.

균형 시간:

반상 크로마토그래프 기둥은 최소한압력과 베이스라인이 안정될 때까지 10배의 기둥 부피의 흐름이 균형을 이룬다.

3. 조작 조건 제어:

압력 및 유속:

압력의 급격한 변화를 피하고 유속을 조절할 때는 천천히 진행해야 한다.유속은 크로마토그래피 기둥의 규격에 따라 조정해야 하며, 크로마토그래피 기둥을 초과하는* 허용 압력이 큽니다.

온도 관리:

온도 순환의 변화를 피하고, 기둥의 온도가 높아지면 시스템의 압력을 낮출 수 있지만, 기둥의 온도를 높여 압력을 과도하게 낮추는 것은 좋지 않다.

pH 범위:

반상 크로마토그래프 기둥 추천pH 범위는 1-12이지만 극 * pH 조건 (예: pH ≥ 8) 은 결합상 수해와 실리콘 용해를 가속화하므로 사용 온도를 낮추고 조작 시간을 단축해야 한다.

4. 샘플 처리

샘플 정화:

샘플 중의 불순물은 크로마토그래피 기둥 오염의 주요 원천이다.고체 추출 권장 (SPE) 작은 기둥 또는 초임계 유체 추출(SFE) 시스템에서 시료를 정화합니다.

샘플 필요0.2μm 여과막을 여과하여 여과막 재료가 샘플 용제와 호환되도록 보장하고 여과막이 용해되어 크로마토그래피 기둥을 오염시키지 않도록 한다.

용매 선택:

샘플 용제는 흐름과 호환되어야 하며, 샘플이 들어간 후 침전이 발생하거나 용제가 서로 용해되지 않는 것을 피해야 한다.유동상 또는 유동상보다 세척 강도가 약한 용액을 사용하여 샘플을 용해하여 우수한 피크 형태와 감지 감도를 얻는 것이 좋습니다.